关键词： 重型β地中海贫血   骨钙素   睾酮  

摘要： 目的与意义:本文拟通过研究重型β地中海贫血患儿一般生长发育情况和青春期前期及青春期骨钙素与性腺激素的水平,探讨重型β地中海贫血患者血清骨钙素与性腺功能相关性,为该病患儿性腺功能减退及生长发育迟缓相关并发症的诊治提供依据。方法:通过回顾2012年01月01日至2021年12月31日于广西医科大学第一附属医院血液内科就诊,通过血红蛋白电泳及基因分型确诊为重型β地中海贫血男性患者资料,收集患儿一般情况(年龄、身高、体重、血清骨钙素(BGP)、生长激素(GH))、性腺激素(包括促卵泡生成素(FSH)、促黄体生成素(LH)、睾酮(TESTO))。同时随机选择同期在该医院就诊的2-18岁非地中海贫血青少年儿童作为对照组。分析两组之间在年龄、身高、体重、血清骨钙素、生长激素和性腺激素(促卵泡雌激素、促黄体生成素、睾酮)水平间的差异,并研究地中海贫血患者青春期前、后骨钙素与性腺激素水平,分析患者血清骨钙素与性腺激素之间的相关性。统计分析使用SPSS软件(版本号23.0)进行。结果:1)与对照组相比较,重型β地中海贫血患者平均身高、体重显著低于对照组(P均<0.01)。病例组640例男性重型β地中海贫血患者中有321例(50.2%)患儿身高低于全国同性别、同年龄青少年儿童平均身高的2SD,有240例(37.5%)患儿体重低于全国同性别、同年龄青少年儿童平均体重的2SD;对照组中58例男性正常青少年儿童中有18例(31%)身高低于全国同性别、同年龄青少年儿童平均身高的2SD,无一例(0%)体重低于全国同性别、同年龄青少年儿童平均体重的2SD;病例组与对照组相比,身材矮小、体重低下发生率显著升高(P<0.01)。2)病例组与对照组的骨钙素、生长激素与性腺激素水平比较,病例组BGP水平显著升高(P<0.01),GH、FSH水平显著降低(P<0.05),两组间LH、TESTO水平无统计学差异。3)移植前、后地中海贫血患者骨钙素、生长激素与性腺激素水平比较,移植后患者的BGP、FSH、LH显著高于移植前患者(P<0.05),而GH则显著低于移植前患者,两组间TESTO水平无显著差异。4)病例组不同年龄段患者骨钙素、生长激素与性腺激素水平比较,≥12岁患者与<12岁患者相比,≥12岁患者FSH、LH、TESTO水平显著升高(P<0.01),BGP、GH水平两组间无显著差异。5)病例组中不同骨钙素水平患者的生长激素、性腺激素水平比较,与低BGP组相比,高BGP组患者FSH显著升高,两组间GH、LH、TESTO水平无显著差异。在<12岁患者中,高BGP与低BGP两组间相比,GH、FSH、LH、TESTO等指标水平均无显著差异,在≥12岁患者中,高BGP组患者的LH、TESTO水平显著高于低BGP组(p=0.00),GH、FSH水平无显著差异。6)骨钙素与年龄的Pearson相关分析及性腺激素的Spearman相关性分析,结果显示,β地贫患者BGP与FSH、LH呈显著正相关,与年龄、TESTO无显著相关性;在<12岁患者中,BGP与FSH呈显著正相关,与年龄、LH、TESTO等因素均无显著相关性,在≥12岁患者中,BGP与LH、TESTO呈显著正相关,与年龄、FSH无显著相关性。结论:1)本研究中观察到,在≥12岁患者中骨钙素与睾酮水平存在显著的正相关,骨钙素对睾酮水平具有一定的调控作用。2)与对照组相比,重型β地中海贫血患儿身材矮小、低体重的发生率显著增高,且生长激素、性腺激素水平偏低。生长发育迟缓、性腺功能减退等内分泌并发症在重型β地中海贫血症患者中较为常见,对重型β地中海贫血患者进行定期内分泌功能评估是必要的。3)移植后患者性腺激素水平有所升高,造血干细胞移植使重型β地贫患者性腺功能得到一定程度的改善,建议尽早行造血干细胞移植治疗。

关键词： 地中海贫血患者   负性生活事件   生活质量   心理资本   领悟社会支持   团体辅导  

摘要： 地中海贫血患者是一个特殊的慢病群体,他们从小就比正常同龄人面临着更大的压力,生活质量受到很大的影响。关注他们的生存状态及影响因素,并针对性地进行干预,对于促进他们的身心健康,提高他们的生活质量,具有十分重要的前瞻性和现实意义。本研究分为两个子研究:研究一为调查研究,以广东、广西两省14～25岁的地中海贫血患者为研究对象,采用积极心理资本量表(PPQ)、领悟社会支持量表(PSSS)、青少年负性生活事件量表(ASLEC)、生活质量量表(SF-36),探究负性生活事件与地中海贫血患者生活质量的关系、领悟社会支持以及心理资本在负性生活事件对生活质量的影响上可能起的作用。研究二为干预研究,从深圳市第二人民医院规律输血的重型地中海贫血患者中,筛选并纳入30名患者,随机分为两组,每组15人,分别纳入实验组和对照组。对照组仅接受常规的护理健康宣教,实验组在对照组的基础上接受每周一次基于心理资本的团体心理辅导,实验组和对照组每次时长均为2小时。8周干预结束后,比较两组干预前后的心理资本和生活质量得分,探究基于心理资本的团体心理辅导是否对提高地中海贫血患者的心理资本以及他们的生活质量有帮助。本研究发现:(1)地中海贫血患者的生活质量较健康人群偏低,且与其负性生活事件呈负相关,与心理资本、社会支持呈正相关。(2)心理资本在地中海贫血患者负性生活事件对生活质量的影响上起中介作用,领悟社会支持在地中海贫血患者负性生活事件对生活质量的影响上起调节作用。(3)基于心理资本的团体心理辅导能提高患者的心理资本水平,同时提高患者的生活质量。

关键词： β地中海贫血   iPSCs   造血分化   CRISPR-Cas9基因编辑  

摘要： 【目的】构建β地中海贫血βCD17-i PSCs;鉴定稳定传代的βCD17-i PSCs多能性、基因组稳定性以及体外造血分化能力;基于CRISPR-Cas9系统,建立用于βCD17（A>T）修复的体外基因编辑体系。【方法】本课题利用仙台病毒载体转导ESCs中特异性表达的关键转录因子至βCD17纯合突变重型β地中海贫血患者的PBMC,重编程获得非整合型βCD17-i PSCs,无饲养层法传代培养使βCD17-i PSCs体外增殖,RT-PCR法鉴定病毒载体残留情况;AP染色、TRA-1-60染色以及dd PCR染料法鉴定βCD17-i PSCs多能性,G显带染色体核型分析鉴定βCD17-i PSCs基因组稳定性;OP9细胞与βCD17-i PSCs体外共培养诱导其向红系造血干细胞分化,流式细胞术检测培养细胞表面识别抗原,确认CD34+红系造血干细胞;针对βCD17突变位点修复的策略,在HBB第一外显子框下游52bp处设计4对sg RNA电转293T细胞进行筛选,并插入PX459、peg RNA载体构建目的质粒,通过脂质体转染293T细胞,鉴定HDR效率。【结果】体外重编程28天左右获得βCD17-i PSCs,后续传代培养观察βCD17-i PSCs可维持典型集落状态,在P18获得无病毒载体残留的βCD17-i PSCs;βCD17-i PSCs在传代培养中可维持干性,且具有正常二倍体核型（46,XY）;OP9细胞体外共培养后部分βCD17-i PSCs分化为CD34+细胞;通过RNP体系电转293T细胞筛选出高效切割的sg RNA序列,插入PX459载体构建目的质粒,转染至293T细胞中,检测HDR效率约为3.68%,此外根据sg RNA序列设计并构建peg RNA目的质粒,利用PE2系统转染至293T细胞中,HDR效率可达7.50%。【结论】本课题通过体外重编程成功构建了非整合型βCD17-i PSCs,经过鉴定证实了βCD17-i PSCs多能性、基因组稳定性以及体外造血分化能力,此外构建了修复βCD17（A>T）的高效基因编辑体系,并初步检测了编辑效率,为后续基于βCD17-i PSCs平台探索基因治疗的临床前研究提供了实验基础。

关键词： 单倍体相合   HLA全相合   造血干细胞移植   重型β地中海贫血   内分泌代谢疾病  

摘要： 目的:观察重型β地中海贫血患儿移植前、经不同供者来源的造血干细胞移植(HSCT)术后6个月内、1年内、2年内及2年以上的空腹血糖、空腹胰岛素、甲功三项、生长激素、骨钙素、甲状旁腺激素、血清钙磷离子水平变化情况,探讨HSCT对重型β地中海贫血患儿的内分泌功能有无影响,比较不同供者来源(单倍体相合、HLA全相合)的HSCT对重型β地中海贫血患儿的内分泌功能影响有无差异。为造血干细胞移植术后重型β地贫患者后期的随访及临床干预提供参考。 方法:根据纳入标准,选择2017年1月至2020年12月在广西医科大学第一附属医院行造血干细胞移植的重型β地中海贫血患者,根据供者来源的不同,分为单倍体组(25例,其中男15例,女10例,移植时年龄介于3-18岁,中位年龄8岁,移植后随访时长5-31月,中位随访时间12.96月);HLA全相合组(102例,其中男61例,女41例,移植时年龄介于2-17岁,中位年龄7岁,移植后随访时长5-51月,中位随访时间15.89月);选择相应年龄段确诊为重型β地中海贫血而未行移植的患者为未移植组(192例,其中男117例,女75例,年龄介于3-13岁,中位年龄7岁);选择相应年龄段的健康儿童为健康对照组(91例,其中男57例,女34例,年龄介于2-18岁,中位年龄10岁)。观察四组的空腹血糖、空腹胰岛素、甲功三项、生长激素、骨钙素、甲状旁腺激素、血清钙磷离子水平变化情况,运用倾向性评分匹配法(PSM)平衡各组的基线特征,比较四组的内分泌代谢指标水平有无差异;构建广义估计方程(GEE)模型分析单倍体组及全相合组移植前后不同时间段的内分泌代谢指标变化情况。 结果:1.倾向性评分匹配前,各个时间段内单倍体组、全相合组、未移植组及健康对照组的空腹血糖、空腹胰岛素、甲功三项、生长激素、骨钙素、甲状旁腺激素、血清钙离子水平的组间比较均存在显著性差异(P<0.05);四组的血清磷离子水平在移植前、移植后12-24月内、移植后24月以上的时间段内存在显著性差异(P<0.01)在移植后6月内、6-12月内组间对比无显著性差异(P>0.05)。2.经PSM平衡组间基线资料后,单倍体组、全相合组、未移植组及健康对照组的空腹血糖水平在移植前、移植后6月内、6-12月内其差异有统计学意义(P<0.01),在12-24月内其差异无统计学意义(P>0.05);匹配后各个时间段内四组的空腹胰岛素水平无显著性差异(P>0.05);匹配后四组的FT3水平在移植前其差异有统计学意义(P<0.01),在移植后6月内、6-12月内、12-24月内其差异无统计学意义(P>0.05);匹配后四组的FT4水平在移植前、移植后6月内其差异有统计学意义(P<0.05),在移植后6-12月内、12-24月内其差异无统计学意义(P>0.05);匹配后四组的TSH水平在移植前、移植后6-12月内其差异有统计学意义(P<0.05),在移植后6月内、12-24月内其差异无统计学意义(P>0.05);匹配后四组的生长激素水平在移植前、移植后6月内其差异有统计学意义(P<0.05),在移植后6-12月内、12-24月内其差异无统计学意义(P>0.05);匹配后四组的骨钙素水平在移植前、移植后6月内、6-12月内其差异有统计学意义(P<0.01),在移植后12-24月内其差异无统计学意义(P>0.05);匹配后各个时间段内四组的甲状旁腺激素水平无显著性差异(P>0.05);匹配后四组的血清钙离子水平在移植前、移植后6-12月内其差异有统计学意义(P<0.01),在移植后6月内、12-24月内其差异无统计学意义(P>0.05);匹配后四组的血清磷离子水平在移植前其差异有统计学意义(P<0.01),在移植后6月内、移植后6-12月内、12-24月内其差异无统计学意义(P>0.05)。***分析显示:(1)单倍体组与全相合组在移植前及移植后不同时间段内各项内分泌指标的组间对比无显著性差异(P>0.05)。(2)单倍体组移植前及移植后不同时间段的空腹血糖、空腹胰岛素、TSH、生长激素、甲状旁腺激素、血清钙磷离子水平组内对比存在显著性差异(P<0.05);在FT3、FT4及骨钙素水平的组内对比中无显著性差异(P>0.05)。(3)HLA全相合组移植前及移植后不同时间段的空腹血糖、空腹胰岛素、甲功三项、骨钙素、甲状旁腺激素、血清钙磷离子水平组内对比存在显著性差异(P<0.05);在生长激素水平的组内对比中无显著性差异(P>0.05)。 结论:1.单倍体相合与HLA全相合的HSCT对重型β地中海贫血患儿的空腹血糖、空腹胰岛素、甲功三项、生长激素、骨钙素、甲状旁腺激素、血清钙磷离子水平的影响组间对比无显著性差异。说明在对重型地贫患儿内分泌功能影响方面,行单倍体相合HSCT与行HLA全相合的H

关键词： 宜宾翠屏区   血细胞筛查   地中海贫血基因特征  

摘要： 目的:通过血细胞筛查及地中海贫血基因检测,了解宜宾翠屏区孕妇地中海贫血检出率以及基因特征;同时对该人群地中海贫血基因检测结果进行分析,为宜宾翠屏区孕妇的产前优生遗传咨询以及制定预防出生缺陷措施提供参考依据。方法:选择2015年2月-2019年6月期间在宜宾市第二人民医院产检的翠屏区孕妇,且血细胞分析中血红蛋白(hemoglobin,Hb)<110g/L,平均血红蛋白体积(mean corpuscular volume,MCV)<80fl,平均血红蛋白含量(mean corpuscular hemoglobin,MCH)<27pg 满足任意一项(即为血细胞筛查阳性)的孕妇6237例,应用Gap-PCR、PCR/寡核苷酸探针反向斑点杂交法对上述孕妇行地中海贫血基因检测,并分析其基因类型。结果:(1)6237例孕妇中,有2278例明确诊断为地中海贫血,检出率为36.52%,患者年龄18-42岁,平均年龄(28.25±1.14)岁;2278例地中海贫血(简称地贫)患者中,α-地贫患者1142例,占比50.13%,β-地贫患者935例,占比41.05%,α合并β地贫患者201例,占比8.82%。(2)在1142例α地中海贫血孕妇中,检出缺失型α地中海贫血SEA、α3.7、α4.2三种类型,属于中国人种较为常见的基因类型,检出基因类型与构成比分别为:--SEA患者619例,占比54.20%,-α3.7型患者343例,占比30.04%,-α4.2患者50例,占比4.38%。检出突变型α地中海贫血(Hb Constant Spring,Hb CS)、(Hb Westmead,Hb WS)、(Hb Quong Sze,Hb QS)三种类型,检出基因类型与构成比分别为:CS患者47例,占比4.11%,WS患者43例,占比3.77%,QS患者40例,占比3.50%。(3)在935例β地中海贫血孕妇中,检测结果显示出,CD41-42患者 356 例,占比 38.07%,CD17 患者 271 例,占比 28.98%,IVS-Ⅱ-654患者215例,占比23.00%,-28患者33例,占比3.53%,-29患者27例,占比2.89%,CD71-72患者21例,占比2.25%,CD27/28患者12例,占比 1.28%。(4)在201例α合并β地中海贫血孕妇中,检测结果显示出,α3.7合并CD41-42患者56例,占比27.86%,SEA合并CD41-42患者40例,占比19.90%,α3.7合并CD17患者36例,占比17.91%,SEA合并CD17合并IVS-Ⅱ-654 患者33例,占比16.42%,SEA合并CD17患者24例,占比 11.94%,,α4.2 合并 CD41-42 患者 9 例,占比 4.48%,WS 合并 CD41-42合并IVS-Ⅱ-654患者3例,占比1.49%。(5)在筛查中明确地中海贫血的血细胞分析检查结果显示,α地贫孕妇的 Hb、MCV、MCH 分别为(90.25±4.56)g/L、(76.35±3.56)fl、(21.58± 1.04)pg,β 地贫的 Hb、MCV、MCH 分别为(88.62±4.35)g/L、(74.15±3.58)fl、(22.34±1.16)pg,血细胞分析指标α地贫和β地贫组间对比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:(1)宜宾翠屏区孕妇地中海贫血检出率为36.52%,基因类型以α地贫为主。(2)α地中海贫血基因型以缺失为主,缺失型按照频率高低依次为--SEA/αα、-α3.7/αα、-α4.2/αα,突变型以CS携带为主,缺失型比例明显高于突变型,与国内其他大部分地区相同。(3)β地中海贫血主要以CD41-42、CD17、IVS-Ⅱ-654突变基因型最常见。(4)虽然地中海贫血患者全国各地的患病率存在明显差异,但宜宾翠屏区孕妇人群地中海贫血的基因突变类型与其他地区存在相似趋势。(5)血细胞分析指标在判别α地贫和β地贫之间无特异性。总结:宜宾翠屏区孕妇地贫基因阳性检出率较国内其他部分地区偏高,经由产前筛查能够有效避免重型地贫患儿的出生,对于地区内人群产前基因诊断以及提高人口素质具有重要价值;血细胞分析中红细胞参数属于地中海贫血检查前的重要筛查项目,但存在一定的局限性,经由Gap-PCR、PCR/寡核苷酸探针反向斑点杂交法能够快速且可靠的诊断孕妇地贫基因型,有助于控制重型地中海贫血后代的出生。

关键词： 造血干细胞移植   地中海贫血   患儿   父母   体验   需求  

摘要： 目的：了解重型β地中海贫血（β-TM）患儿造血干细胞移植（HSCT）前其父母的体验及需求，为制定入仓前针对性干预措施提供理论依据。方法：以质性研究中现象学研究方法为指导，采用目的抽样，选取2021年5—7月在深圳市某三级甲等医院移植中心行地中海贫血HSCT前患儿父母为访谈对象，以信息饱和时终止访谈为原则，共纳入15名研究对象，由2名受过培训的护士对其进行半结构式深度访谈，采用Nvivo 11.0管理资料，Colaizzi 7步分析法分析资料。结果：访谈内容共提炼出4个主题：移植前父母感受，身体及经济的多重压力，沉重的心理负担，照顾知识、技能、医务人员支持的需求。结论：医务人员应在HSCT前加强与患儿父母的沟通，帮助搭建医患及患患有效沟通平台，减轻他们的心理负担，满足照顾者的知识技能需求，增强治疗信心，同时应加强宣传，以引起社会重视。

关键词： 他克莫司   群体药物动力学模型   重型地中海贫血   外部评价   病例分析  

摘要： 目的与意义:他克莫司为一种治疗指数窄的药物,临床应用中需要进行治疗药物监测(Therapeutic drug monitoring,TDM)与个体化用药。药动学家们为了优化造血干细胞移植术(Hematopoietic stem cell transplantation,HSCT)后的治疗方案,已经构建了六个他克莫司(Tacrolimus,TAC)的群体药物动力学(Population pharmacokinetic,Pop PK)模型。然而,未有证据表明这些模型外推至本中心重型地中海贫血(β-thalassemia major,β-TM)患儿中的预测性能是否优良。因此,本研究旨在通过典型病例分析明确β-TM移植术后他克莫司个体化用药的意义,并对已发表的TAC Pop PK模型进行系统性外部评价。方法:(1)纳入2019年7月至2020年6月在广西医科大学第一附属医院接受HSCT的β-TM患儿TAC血药谷浓度数据、人口学信息、实验室指标、基因型信息、合并用药信息。(2)对其中典型病例进行回顾性分析。(3)知网、万方、维普、Sinomed及Pubmed数据库中检索已发表的HSCT后口服他克莫司群体药物动力学模型研究,并进行系统性外部评价,方法包括:a.基于预测误差的检验(Prediction error,PE%);b.基于模拟的预测和变异性校正的视觉预测检验(Visual predictive check,VPC)和归一化预测分布误差(Normalized prediction distribution errors,NPDE)测试;c.基于贝叶斯预测,评估先验信息对模型预测性的影响。结果:本研究第一部分回顾了46名患儿的病程,其中13名在移植术后TAC治疗期间出现了GVHD,并对三名发生GVHD患儿病例进行了回顾性分析。第二部分纳入了46名患儿296个口服TAC血药浓度点对已发表的两个造血干细胞移植口服他克莫司群体药物动力学模型进行了系统的外中心适用性评价。基于预测误差、模拟及贝叶斯的评价结果均显示已发表的模型无法描述造血干细胞移植术后重型地中海贫血患儿口服他克莫司群体药动学特征。结论:证实在使用TAC期间个体化用药与密切的治疗药物监测是具有临床价值的。目前已发表的两个HSCT术后口服他克莫司模型在基于预测、模拟及基于贝叶斯评价方面表现均不尽人意,因此不适宜直接外推至本中心β-TM患儿中使用。

关键词： 重型地中海贫血   造血干细胞移植术   糖化血红蛋白   糖尿病  

摘要： 背景和目的:由于长期输血导致肝脏、胰腺等部位铁质沉积,重型地中海贫血患者容易出现糖代谢紊乱,造血干细胞移植(Hematopoietic stem cell transplantation,HSCT)是目前用来治愈重型地中海贫血的主要手段,由于HSCT需要大量使用糖皮质激素、免疫抑制剂等药物以及患者容易发生严重感染、应激等情况,高血糖甚至移植后糖尿病也是HSCT术后患者的常见并发症,因此,对于重型地中海贫血患者来说,长期的血糖监测尤为重要。 糖化血红蛋白(Glycated hemoglobin,HbA1c)是临床上监测长期血糖变化最常用的指标之一,然而重型地中海贫血患者自身的血红蛋白变异体会对HbA1c的检测过程产生一定程度的干扰,从而影响其结果的准确性和可信度。我们的研究目的是重新评估在造血干细胞移植前后的不同时期,HbA1c对重型地中海贫血合并糖尿病的检验效能以及最佳截点值,为临床血糖管理提供依据。 方法:收集2019年3月至2021年8月在广西医科大学第一附属医院就诊的重型β型地中海贫血患者,将纳入研究的331例患者按照造血干细胞移植术前、移植后0～1年、移植后>1年分为3个亚组,以口服葡萄糖耐量试验结果为标准确定糖尿病的诊断。详细收集每个研究对象的临床资料以及相关检查结果,比较并分析各组间一般情况、血糖代谢相关指标、铁过载程度的差异及相关性,通过受试者操作特征(Receiver-operating characteristic,ROC)曲线评估HbA1c对重型地贫患者合并糖尿病的最佳截点值以及诊断价值。 结果:造血干细胞移植术前HbA1c的平均值为6.3%±0.7%,移植后0～1年和移植后>1年分别降至5.0%±0.9%和5.4%±0.7%,以口服葡萄糖耐量试验(Oral glucose tolerance test,OGTT)为诊断标准时,三组糖尿病患病率分别为2.9%、10.6%、3.8%。在移植前的患者中,HbA1c诊断糖尿病的最佳截点值为7.80%,曲线下面积(Area Under the Curve,AUC)为0.889(P=0.022),对应的敏感度和特异度分别为66.7%和99.0%。在移植后0～1年的患者中,HbA1c诊断糖尿病的最佳截点值为5.85%,AUC为0.905(P<0.001),对应的敏感度和特异度分别为80.0%和97.6%。在移植后>1年患者中,HbA1c诊断糖尿病的最佳截点值为5.55%,AUC为0.888(P=0.003),对应的敏感度和特异度分别为100%和68.5%。各组间AUC差异比较无统计学意义(P>0.05)。在造血干细胞移植术前的患者中,胰岛素抵抗指数(Homeostasis model assessment-Insulin resistance,HOMA-IR)与年龄呈正相关(r=0.281,P=0.004)、与病程呈正相关(r=0.265,P<0.007);在造血干细胞移植术后的患者中,HOMA-IR与年龄呈正相关(r=0.396,P<0.001)、与移植后时间呈正相关(r=0.278,P<0.001)。 结论:1、对于重型地中海贫血患者,单纯以HbA1c≥6.5%作为糖尿病诊断截点容易导致误诊,在造血干细胞移植术前、术后≤1年及术后>1年时,诊断糖尿病的HbA1c最佳截点值分别为:7.80%、5.85%及5.55%。 2、尽管重型地中海贫血会对HbA1c的检测产生诸多干扰,但HbA1c仍然是预测重型地中海贫血患者合并糖尿病的可靠指标,具有较高的敏感性和特异性。然而,HbA1c可能无法准确反映移植前重型地中海贫血患者的平均血糖变化。 3、无论重型地中海贫血患者是否接受造血干细胞移植术,胰岛素抵抗的程度仍然会随着年龄的增长而升高,提示对于该类患者,胰岛素抵抗可能是一个不可逆的过程。

关键词： 地中海贫血   异常血红蛋白   α-珠蛋白基因   MALDI-TOF质谱  

摘要： 背景与目的血红蛋白病是由于珠蛋白肽链合成数量减少(地中海贫血)或者珠蛋白结构异常(异常血红蛋白)而引起的遗传性血液病,为常染色体隐性遗传病。地中海贫血以α-地中海贫血和β-地中贫血最为常见,α-地中海贫血主要由α-珠蛋白基因大片段缺失突变引起;异常血红蛋白是因血红蛋白结构异常而造成的,大多数异常血红蛋白不会产生临床症状,少部分异常血红蛋白可使得血红蛋白理化性质和功能发生大的改变进而产生不同程度的临床表型。本研究,我们在一个中国家系中发现了一个新的α-珠蛋白基因变异,为鉴别其为地中海贫血变异还是异常血红蛋白变异,进行了一系列的临床检测和分子生物学试验。研究方法1.研究对象:一个携带α-珠蛋白基因突变的中国家系,先证者是一位22岁的女性。2.研究方法:我们首先在先证者身上发现了 α-珠蛋白基因新变异,为鉴定此新变异,在获得家系知情同意后,我们收集了整个家系的病史信息,采集家系的新鲜血液样本进行血液学表型分析,提取基因组DNA做对家系做地贫基因分析,随后提取RNA分析转录本的变化,检测血红蛋白稳定性,使用毛细管电泳(CE)、反相高效液相色谱(RPHPLC)和MALDI-TOF质谱方法检测血红蛋白及分析珠蛋白肽链。同时,进行了细胞实验评估此新变异对基因功能的影响,使用生物信息学分析工具,预测位点的生物保守性以及位点发生变异对蛋白结构的影响。结果通过对整个家系的DNA检测,确认了发生在α-珠蛋白基因上的新变异HBA2:c.322G>C,确定变异的遗传模式为常染色体隐性遗传,然后对RNA的分析发现异常转录本,变异携带者的α/β肽链比例与正常人相比无变化,血红蛋白稳定,随后使用MALDI-TOF质谱技术检测到了异常α肽链,再结合家系基因型和表型信息,将此新变异鉴定为异常血红蛋白,并对其命名。总结本研究的先证者携带α-地贫(-α)缺失突变复合HBA2:c.322G>C变异,此变异为世界首次报道,我们通过质谱技术将其鉴定为异常血红蛋白,结构稳定,不影响表型,根据先证者的出生地将其命名为Hb Liaobu[α2 107(G14)Val→Leu]。

关键词： 地中海贫血   ABO新生儿溶血病   溶血三项试验   总胆红素   血红蛋白  

摘要： 目的:探讨携带地中海贫血基因与未携带地中海贫血基因的ABOHDN患儿总胆红素(TSB)、血红蛋白(Hb)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)水平及溶血三项试验结果的差异,为临床治疗携带地中海贫血基因的ABO-HDN患儿提供一定的参考依据。方法:采集7日龄内新生儿足跟血进行地中海贫血筛查,并收集新生儿相关临床病例资料,对母婴血型不合的患儿进行溶血三项试验检测。将ABO-HDN患儿分为携带地中海贫血基因组和未携带地中海贫血基因组,分析两组患儿的TSB、Hb、MCH及直接抗人球蛋白试验(DAT)阳性率、游离试验阳性率、溶血三项试验皆为阳性的比率等方面的差异。结果:1.本研究共收集地中海贫血基因初筛阳性者1298例,52例发生了ABO-HDN,作为携带地中海贫血基因组;选入141例未携带地中海贫血基因的ABO-HDN患儿作为未携带地中海贫血基因组。193例ABO-HDN患儿的TSB在胎龄、出生体重、就诊日龄上差异具有统计学意义,患儿就诊日龄越大,溶血情况越重。2.193例ABO-HDN患儿溶血三项试验结果表明,DAT阳性组和DAT阴性组的TSB和Hb水平分别为[235.7(90.5)VS 221.1(74.6)]μmol/L及[(146.58±27.32)VS(168.54±19.51)]g/L,差异具有统计学意义。DAT阳性组TSB水平较高而Hb水平较低,说明DAT阳性患儿的溶血及贫血情况较重。3.溶血三项试验皆为阳性者54例,非全阳性者139例,两组的TSB和Hb水平分别为[243.4(97.4)VS 221.2(75.0)]μmol/L及[(146.06±25.73)VS(167.80±20.98)]g/L,差异具有统计学意义。溶血三项试验皆为阳性者TSB水平较高而Hb水平较低,表明溶血三项试验皆为阳性的患儿溶血及贫血情况严重。4.52例携带地中海贫血基因与141例未携带地中海贫血基因的ABO-HDN患儿,在TSB[229.9(82.1)VS 204.9(76.8)]μmol/L、Hb[(153.92±20.89)VS(164.59±25.02)]g/L及MCH[(32.33±3.46)VS(36.26±1.80)]pg水平上的比较差异均有统计学意义。携带地中海贫血基因组的TSB较高,Hb及MCH较低,说明携带地中海贫血基因的ABO-HDN患儿较未携带地中海贫血基因的ABO-HDN患儿溶血及贫血情况严重。结论:1.患儿就诊日龄越大,发生ABO-HDN时溶血情况越重,DAT阳性是较好的预测血清胆红素水平升高的指标,DAT阳性患儿溶血及贫血情况较重。2.溶血三项试验皆为阳性的患儿,溶血及贫血情况较重,溶血三项试验可以对患儿的溶血情况、病情严重程度有较好的提示作用。3.在ABO-HDN患儿中,携带地中海贫血基因者TSB较高,Hb及MCH较低,发生ABO-HDN时溶血及贫血情况较严重。