关键词： 动态浊度法   Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗   中间产品   干扰试验   准确度试验   精密度试验  

摘要： 目的:建立一种用于检测Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗及其中间产品中细菌内毒素含量的方法。方法:应用细菌内毒素动态试管检测仪检测Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗及其中间产品中细菌内毒素含量,并对方法的标准曲线可靠性、准确度、精密度和耐用性进行验证。结果:细菌内毒素含量在0.125~2EU/ml范围内,标准曲线回归方程为LgTg=2.918-0.2760LgC(∣r∣=0.9964);干扰试验中,供试品细菌内毒素含量回收率为62.82%~101.04%;准确度试验中,供试品细菌内毒素含量回收率为64.54%~93.74%;精密度试验中,3名实验人员测试的平均反应时间相对标准偏差(RSD)均小于4%,18次测试的平均反应时间总RSD小于8%,供试品细菌内毒素含量回收率为76.66%~149.65%;使用不同厂家鲎试剂时,供试品细菌内毒素含量回收率为76.66%~112.68%。结论:动态浊度法可用于Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗及其中间产品中细菌内毒素的定量检测。

关键词： Vero细胞DNA残留   定量聚合酶链反应   DNA探针杂交法  

摘要： 目的验证Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗中Vero细胞DNA残留定量PCR(quantitative PCR,qPCR)检测法。方法用试剂盒提取Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗原液的DNA,采用qPCR检测Vero细胞DNA,并验证方法的线性、专属性、准确性、精密度、耐用性及定量限;同时采用DNA探针杂交法检测样品。结果qPCR检测Vero细胞DNA标准曲线在0.0030~300.0000pg/μl之间线性良好;对Hep-2细胞、大肠埃希菌、酵母细胞DNA均无扩增反应;高、中、低浓度样品加标回收率在50%~150%,准确性良好;定量检出限为0.0030pg/μl;精密度良好(相对标准偏差<15%);反应体系配制好后置于2~8℃30min后进行检测,相对标准偏差<15%,耐用性良好。DNA探针杂交法与qPCR结果均小于0.1pg/μl。结论qPCR检测Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗中Vero细胞DNA残留具有良好的线性、专属性、准确性、精密度和耐用性,可适用于该项检测。

关键词： 脊髓灰质炎疫苗   顾方舟   脊髓灰质炎减毒活疫苗   中国医学科学院   脊髓灰质炎病毒   脊灰   脊髓灰质炎活疫苗   人的生命  

摘要： 顾方舟(1926年6月—2019年1月),著名医学科学家、病毒学家。长期从事脊髓灰质炎减毒活疫苗研究,建立了脊髓灰质炎病毒的分离与定型方法,制定了脊髓灰质炎活疫苗的试制与安全性标准。我国脊髓灰质炎疫苗研发生产的拓荒者、科技攻关的先驱者,研发的脊髓灰质炎疫苗“糖丸”护佑了几代中国人的生命健康,让中国进入无脊髓灰质炎时代。2019年,被追授“人民科学家”国家荣誉称号。他被孩子们亲切地称为“糖丸爷爷”。他就是我国著名医学科学家、病毒学专家,中国医学科学院原院长——顾方舟。一粒小小的糖丸,承载的是很多人童年里的甜蜜记忆。

关键词： 脊髓灰质炎   脊髓灰质炎疫苗高变异株病毒   急性弛缓性麻痹  

摘要： 2021年6月,浙江省1例6月龄急性弛缓性麻痹(AFP)监测病例检出Ⅲ型脊髓灰质炎(脊灰)疫苗高变异株病毒(VHPV),分离培养的病毒与Sabin疫苗株相比在VP1区有6个核苷酸变异。病例有3剂次脊灰疫苗免疫史,发病时左上肢肌力Ⅱ级,临床诊断为肩蜂窝织炎(左侧),经治疗后恢复正常,神经系统检查无异常,痊愈出院。病例后续采集的标本中未再分离到VHPV,密切接触者中未检出VHPV,病例所在县区医疗机构主动搜索及社区人群搜索未发现类似病例。由于病例未出现VHPV所致脊灰的类似临床症状,经专家组讨论排除脊灰。本例VHPV发现及时,并采取有效措施,未造成病毒进一步传播,提示需继续保持AFP病例监测系统的敏感性,提高适龄儿童脊灰疫苗接种率,遏制脊灰病毒传播和流行。

关键词： 双重逆转录PCR   肠道病毒   脊髓灰质炎病毒   急性弛缓性麻痹   疫苗衍生脊髓灰质炎病毒   脊髓灰质炎病毒疫苗类似株  

摘要： 目的 构建双重逆转录PCR对急性弛缓性麻痹(AFP)病例中脊髓灰质炎病毒(PV)和肠道病毒(EV)进行检测和基因分型。方法 从2021年河南省AFP病例中细胞分离得到的36株EV和7株PV粪便标本,利用EV VP4区引物EVP4、OL68-1和PV VP1区引物UG1、UC11构建双重逆转录PCR进行检测,分析特异性和敏感性;以细胞分离培养阳性结果为参照,分析双重逆转录PCR检测的灵敏性。结果 18株EV检测为阳性,4株EV检测为弱阳性,阳性率为61.1%;5株PV检测为阳性,阳性率为71.4%。EV以柯萨奇B组病毒3型为主,PV均为疫苗类似株。结论 本次实验构建的双重逆转录PCR可以作为PV和EV的辅助诊断手段。

关键词： 脊髓灰质炎   疫苗免疫策略转换   急性弛缓性麻痹   监测  

摘要： 目的 了解河南省脊髓灰质炎(脊灰)疫苗免疫策略转换(转换)对急性弛缓性麻痹(AFP)病例监测结果的影响。方法 对河南省两次转换(2016年5月1日和2019年10月1日)前后1年内AFP监测信息报告管理系统中报告的1 975例AFP病例共计3 949份粪便标本进行病毒分离培养鉴定,使用SPSS 19.0软件对AFP病例的流行病学数据进行统计分析。结果 第一次转换前后共报告AFP病例分别为467例和485例,发病率分别为2.38/10万和2.46/10万(P>0.05),残留麻痹的构成比分别为10.06%和12.99%(P>0.05),死亡的构成比分别为0.64%和1.24%(P>0.05),采集标本分别为934和970份,脊灰病毒(PV)分离率分别为1.07%和1.55%(P>0.05),PV I型分离率分别为0.43%和0.93%(P>0.05),PV Ⅲ型分离率分别为0.54%和0.62%(P>0.05),核苷酸变异数≤5分别占90.00%和80.00%,非脊灰肠道病毒(NPEV)分离率分别为6.85%和8.45%(P>0.05);第二次转换前后共报告AFP病例分别为544例和479例,发病率分别为2.75/10万和2.34/10万(P<0.05),残留麻痹的构成比分别为8.09%和6.05%(P>0.05),死亡的构成比分别为1.65%和0.42%(P>0.05),采集标本分别为1 087和958份,PV分离率分别为0.83%和0.42%(P>0.05),PV I型分离率分别为0.37%和0.21%(P>0.05),PV Ⅲ型分离率分别为0.46%和0.21%(P>0.05),核苷酸变异数≤5均占100.00%,NPEV分离率分别为4.14%和1.04%(P<0.05)。AFP病例主要集中在5岁以下儿童,占70.08%,其中3岁以下病例数最高,占51.80%,男女性别比1.80∶1。报告病例最多的3个地区分别为郑州市、南阳市、周口市,分别占24.00%、9.01%和9.01%;时间主要集中在春秋两季,疾病谱以吉兰-巴雷综合征和短暂性肢体麻痹为主。结论 河南省两次免疫策略转换前后AFP病例的地区、时间、人群分布、疾病谱以及60天后残留麻痹和死亡构成比均无明显变化,PV I型分离率高于Ⅲ型,核苷酸均以≤5个变异为主,AFP发病率和NPEV分离率在第二次转换后显著下降。

关键词： 脊髓灰质炎疫苗   疑似预防接种异常反应   安全性  

摘要： 目的 分析2020—2022年陕西省脊髓灰质炎（脊灰）疫苗接种后疑似预防接种异常反应（AEFI）发生情况。方法通过AEFI监测信息管理系统收集陕西省2020—2022年脊灰疫苗监测数据，采用描述性流行病学方法进行分析。结果陕西省2020—2022年共报告脊灰疫苗AEFI病例474例，男女性别比为1.13:1(251/223)，报告发生率为10.73/10万；一般反应455例，占95.99%(455/474)，报告发生率为10.30/10万，以发热、红肿、硬结为主；异常反应11例，占2.32%(11/474)，报告发生率为0.25/10万，以过敏性皮疹为主。无严重AEFI病例报告，AEFI病例痊愈或好转占99.16%(470/474)，总体转归情况良好。结论 陕西省脊灰疫苗安全性良好。

关键词： 急性弛缓性麻痹   非脊髓灰质炎肠道病毒   环境监测   分子流行病学  

摘要： 背景非脊髓灰质炎肠道病毒(Non-polio enterovirus,NPEV)是人肠道感染最常见的病原体之一,与脊髓灰质炎病毒(Polio-virus,PV)类似,可引起急性弛缓性麻痹(Acute Flaccid Paralysis,AFP),还可引起手足口病、新生儿感染或无菌性脑膜炎等严重疾病暴发或流行,对人们的生产生活造成严重影响。2000年WHO证实中国进入无脊灰状态,NPEV逐渐成为AFP病例样本中分离出的主要病原体。但是我国目前没有NPEV特定的监测系统,尚未有系统全面的研究报道广东省消灭脊灰后AFP病例中NPEV检出变化情况。研究目的与意义本文旨在探究2000-2021年广东省AFP病例的病原学及流行病学特征,结合环境污水监测,探讨人群和环境中NPEV流行的优势血清型,了解消灭脊灰以来AFP病例及环境中NPEV的长期循环动态变化情况,以期发现疾病的暴发或流行趋势与优势血清型变化间的联系,为制定有效预防控制肠道病毒所致相关疾病的措施提供科学理论依据,对监测工作开展具有十分重要意义。此外,在缺乏完善的肠道病毒监测系统的情况下,环境监测是调查人群中肠道病毒隐匿传播强大而有效的工具,可能为肠道病毒传播预警或疫情暴发判断提供数据支撑。研究内容及方法通过收集广东省AFP病例网络监测系统中2000年1月至2021年12月所有病例信息,其中共有572例NPEV 阳性病例,对其进行流行病学分析,并将NPEV阳性病例样本分离到的572株NPEV进行毒株复传、复核鉴定、VP1分型及全基因组扩增测序。结合2009年1月至2021年12月在环境污水中分离到的2195株NPEV进行分析,获得AFP监测及环境污水监测中NPEV长期循环动态变化情况,并对引起暴发的优势血清型EV-A71和E11进行分析,对获得的基因序列进行核苷酸与氨基酸同源性分析。此外,与在GenBank中选取的代表株基因序列构建系统进化树,进行基因亚型分析及重组分析。研究结果1.2000-2021年广东省AFP病例中NPEV阳性患者占所有AFP病例的7.63%(572/7492),NPEV 阳性病例检出数量在夏秋季出现高峰,以5～6月为主,年龄主要集中在1～<3岁,男女性别检出差异不具有统计学意义。2.572株NPEV共有45种血清型,其中EV-B组检出数量最多,占58.74%(336/572),有33种血清型,其次是EV-A组9种血清型和EV-C组3种血清型。检出最多的血清型是EV-A71、其次是 CVA4、CVB3、E11。2008-2013 和 2016-2017 年以 EV-A71 为主,2019 年则主要为E11,2020-2021年分离到较多的是CVB3。3.2009-2021年环境污水中NPEV检出数在夏秋季出现高峰,以5～7月为主。污水中共分离到2195株NPEV,共有21种血清型,其中EV-B组检出数量最多,占99.13%(2176/2195),有18种血清型,其次是EV-A组有1种血清型和EV-C组有2种血清型,分离到最多的血清型是E11,其次是E6、CVB5、E7和CVB3。2017年以前以E6检出为主,2018-2019年E11显著增长,2020-2021年主要分离到的则是CVB3。***-A71是AFP病例中检出的优势血清型,均为C4基因型,以C4a基因亚型为主,但2000-2001年和2005年有C4b基因亚型。2016年EV-A71疫苗上市后,EV-A71检出数显著下降。2018年后AFP病例样本未检出EV-A71。5.E11是环境污水监测中的优势血清型。2019年E11在广东省引起了两起新生儿感染事件,两起新生儿感染与散发病例以及同年污水中检出的E11均为D5基因型,而2018年污水中早已检出大量E11且均为D5基因型,但2017年及以前则以A1基因型为主。研究结论1.广东省AFP病例中NEPV检出季节主要集中在夏秋季,检出年龄以1～<3岁为主。***病例和环境污水中检出的NPEV血清型分别为45种和24种,呈现多样性特点。EV-A71是AFP病例监测中相对优势的血清型,在2008年检出显著增加,而2016年EV-A71疫苗上市后,EV-A71检出显著减少;E11是环境污水监测中相对优势的血清型,2018-2019年E11检出数量显著增加,2020年以后基本未检出。3.不同血清型的出现频率随季节、时空因素的不同而有差异,优势血清型随时间变化也在发生改变,需持续监测和探索NPEV分子流行病学和分布规律。

关键词： 脊髓灰质炎疫苗   疑似预防接种异常反应   报告发生率  

摘要： 目的 分析2011—2020年泉州市脊髓灰质炎（脊灰）疫苗疑似预防接种异常反应（AEFI）的报告发生情况，评价疫苗安全性。方法 通过中国免疫规划信息管理系统收集2011—2020年泉州市三价脊灰减毒活疫苗（tOPV）、二价脊灰减毒活疫苗（bOPV）和脊灰灭活疫苗（IPV）的AEFI报告数据，采用描述性流行病学方法分析AEFI报告发生率。结果 2011—2020年泉州市共报告脊灰疫苗AEFI病例150例，报告发生率为2.49/10万剂。其中tOPV、bOPV和IPV的报告发生率分别为1.30/10万剂、2.65/10万剂和5.62/10万剂，一般反应报告发生率分别为0.84/10万剂、1.62/10万剂和4.61/10万剂，异常反应报告发生率分别为0.32/10万剂、0.81/10万剂和0.37/10万剂。异常反应病例中，接种tOPV、bOPV和IPV后诊断为过敏性皮疹的报告发生率分别为0.32/10万剂、0.43/10万剂和0.37/10万剂，接种后诊断为疫苗相关麻痹型脊灰（VAPP）的报告发生率分别为0.00/10万剂、0.16/10万剂和0.00/10万剂。结论 泉州市脊灰疫苗AEFI报告发生率在预期范围内，总体安全性良好，但监测敏感性有待提高。

摘要： 脊髓灰质炎，简称脊灰，导致该病的病原体是脊髓灰质炎病毒，简称脊灰病毒。由于该病常侵袭儿童，因此也被称为小儿麻痹症。尽管脊灰病毒感染很常见，但绝大多数人根本没有症状，即使有症状通常也比较轻微。然而，脊髓灰质炎又是一种可怕的传染病，尽管出现严重症状的概率很低，可是一旦发病便会带来非常严重的后果，如呼吸困难、肌肉萎缩、肢体畸形和下肢瘫痪，甚至会导致死亡。