关键词： 脊髓灰质炎病毒   非脊髓灰质炎肠道病毒   环境污水   监测  

摘要： 目的了解新疆环境污水中脊髓灰质炎(脊灰)病毒(Poliovirus,PV)和维持无脊灰状态。方法选取新疆3个城市污水处理厂,2013年4月-2022年12月每月各采集1份污水标本,采用RD和L20B细胞分离PV,采用rRT-PCR对PV分离株进行型内鉴定和VP_(1)区核苷酸序列测定。结果2013-2022年共采集环境污水327份,肠道病毒分离阳性305份(93.3%);共分离到PV 2461株、非脊灰肠道病毒950株。在PV分离株中,Ⅰ型666株、Ⅱ型450株、Ⅲ型1345株;除2018年1株为Ⅱ型疫苗衍生脊灰病毒(Vaccine derived poliovirus,VDPV)、2020年1株为Ⅰ型VDPV外,其余分离株均为疫苗株。结论新疆环境污水中PV分离株主要为疫苗株,未发现脊灰野病毒;环境PV监测为新疆继续维持无脊灰状态提供了实验室依据。

关键词： 中国科学院院士   脊髓灰质炎疫苗   细胞培养技术   毛江森   浙江省医学科学院   病毒学   医学院   干扰素  

摘要： 毛江森2023年5月18日,中国科学院院士、病毒学家、原浙江省医学科学院(现杭州医学院)院长、研究员毛江森在杭州逝世,享年90岁。毛江森从事病毒学研究50年,早期主要从事脊髓灰质炎病毒疫苗和细胞培养技术的研究,对我国脊髓灰质炎疫苗的发展和干扰素的研究工作作出了重要贡献。

关键词： 脊髓灰质炎病毒   常用消毒剂   灭活效果  

摘要： 目的 观察5种常见消毒剂对脊髓灰质炎病毒的杀灭效果,为防控肠道病毒性传染病传播选择有效消毒方法提供依据。方法 采用病毒悬液定量灭活试验方法,对常用的5种消毒剂灭活脊髓灰质炎病毒的效果进行观察。结果 用含有效氯200 mg/L的次氯酸钠消毒液作用10 min,含有效碘5 432 mg/L的碘伏消毒液作用60 min,对脊髓灰质炎病毒的杀灭对数值均> 4.00。用含有效溴500 mg/L的二溴海因消毒液作用45 min,含5 000 mg/L邻苯二甲醛消毒液作用7.5 min,75%乙醇消毒液作用1.5 min,对脊髓灰质炎病毒的杀灭对数值均<4.00。结论 脊髓灰质炎病毒抵抗力较强,不同消毒剂对其杀灭效果差别较大,提示肠道病毒的消毒处置中需谨慎选择消毒剂和消毒时间。

关键词： 脊髓灰质炎疫苗   顾方舟   人的生命   无脊髓灰质炎   糖丸   消灭脊髓灰质炎   口服活疫苗  

摘要： “糖丸”是一批人的儿时记忆,甜甜的一颗小药丸包裹着口服脊髓灰质炎疫苗,使中国进入无脊髓灰质炎时代,护佑了几代中国人的生命健康。作为中国口服活疫苗的开拓者之一,顾方舟为中国消灭脊髓灰质炎的伟大工程做出了不可磨灭的贡献。他被称为“中国脊髓灰质炎疫苗之父”,也被称为“糖丸爷爷”。

关键词： 脊髓灰质炎病毒   篮式反应器   Vero细胞   片状载体  

摘要： 目的探索应用基于片状载体的150 L篮式反应器培养Vero细胞制备脊髓灰质炎(脊灰)病毒的工艺条件.方法按照不同的细胞接种密度,将146代Vero细胞消化传代并接种至150 L篮式反应器中,在相同条件下培养,分时间段取样后,通过检测葡萄糖含量间接监测细胞代谢情况,绘制细胞生长曲线,确定150 L篮式反应器最佳细胞接种密度及反应器最佳培养条件.在150 L篮式反应器内接种Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ型Sabin株脊灰病毒培养,分别通过生化分析仪、微量细胞病变法、ELISA检测一定条件下病毒培养12~96 h的葡萄糖含量、病毒滴度、抗原含量等参数,确定病毒最佳收获时间.结果在基于片状载体的150 L篮式反应器细胞中培养Vero细胞的最佳细胞接种密度为1.5×10^(5)ml^(-1);Vero细胞葡萄糖代谢量在培养120~168 h达到峰值(≥225 g/24 h),细胞密度最高且生长状态稳定.脊灰病毒接种48 h后,随着Vero细胞病变程度的增加,葡萄糖代谢逐渐下降;各型脊灰病毒滴度和D抗原峰值均出现在72 h左右.结论确定了应用基于片状载体的150 L篮式反应器大规模制备脊灰病毒(Vero细胞)的工艺条件.

关键词： 组分无细胞百白破-Sabin株脊髓灰质炎联合疫苗   部分剂量   皮内免疫   免疫持久性  

摘要： 目的评价皮内免疫(intradermal,ID)部分剂量组分无细胞百白破-Sabin株脊髓灰质炎联合疫苗(diphtheria-tetanus-acellular component pertussis and Sabin-derived inactivated poliovirus vaccine,DTacP-sIPV)的免疫持久性。方法将40只Wistar大鼠(雌雄各半)分别经ID部分剂量(DTacP-sIPV 1/5和1/10剂量,即1/5D和1/10D ID组)及肌肉注射(intramuscular,IM)全剂量DTacP-sIPV(全剂量IM组),同时设空白对照组(ID PBS)。于0、1、2月共免疫3次,末次免疫后12个月经尾静脉采血,分离血清。微量中和试验法检测抗脊髓灰质炎病毒中和抗体滴度,间接ELISA法检测大鼠血清中抗白喉毒素(diphtheria toxin,DT)、破伤风毒素(tetanus toxin,TT)、百日咳毒素(pertussis toxin,PT)、丝状血凝素(filamentous haemagglutinin,FHA)和百日咳黏附素(pertactin,PRN)的IgG抗体滴度,并计算抗体几何平均滴度(geometric mean titer,GMT)及抗体阳性率。末次免疫后12个月,经雾化吸入百日咳杆菌气雾进行攻击,攻击时间为30 min,于气雾攻击后2、5、14 d检测各组大鼠白细胞数及肺、气管、鼻部位的菌落克隆形成数(colony-forming unit,CFU)。结果与全剂量IM组比较,1/5D和1/10D ID组脊髓灰质炎病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型中和抗体阳性率差异均无统计学意义(P均>0.05),空白对照组各型抗体阳性率均为0。1/5D、1/10D ID及全剂量IM组DT、TT、PT、FHA和PRN的IgG抗体阳性率均为100%,空白对照组IgG抗体阳性率均为0。与攻击后2 d比较,空白对照组大鼠经百日咳杆菌气雾攻击后5 d的白细胞数明显升高(F=3.48,P<0.05),随后开始下降;其他组均随时间的延长保持平稳(F=0.14~1.30,P>0.05)。气雾攻击后,空白对照组大鼠肺部细菌载量明显高于其他3组(F=19.00~206.00,P<0.05),攻击后14 d仍可检测到百日咳杆菌;除空白对照组外,其他3组大鼠肺部细菌载量均于攻击后5 d达峰值,14 d时基本清除,各时间点组间差异无统计学意义(F=1.14~1.25,P>0.05)。空白对照组各时间点气管和鼻部细菌载量略高于其他组,但差异均无统计学意义(F=0.71~3.54,P>0.05);除空白对照组外,其他3组大鼠气管和鼻部细菌载量较接近,差异均无统计学意义(F=0.75~3.41,P>0.05)。结论ID 1/5D DTacP-sIPV可诱导大鼠产生针对疫苗各组分的持久保护性抗体,本研究为ID部分剂量DTacP-sIPV免疫策略的制订提供了实验依据。

关键词： Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗   5剂量西林瓶   穿刺   质量  

摘要： 目的 评价多次穿刺对5剂量西林瓶包装Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(inactivated poliomyelitis vaccine made from Sabin strains,sIPV)质量的影响。方法 取3批储存约24个月的sIPV,室温平衡至少20 min,开盖取样,即为穿刺前样品;另取相同3批sIPV,于第0、7、14、21、28天分别进行第1~5针穿刺取样,每次取样前均于室温平衡至少20 min,每次取样后剩余样品均返回2~8℃保存。按企业注册标准(YBS01052021)的要求对穿刺前和第5针穿刺样品进行全项检测,其他4针穿刺样品进行pH、渗透压摩尔浓度、无菌试验、细菌内毒素、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型病毒D抗原含量、外观、异常毒性检查、蛋白质含量、2-苯氧乙醇含量检测。计算每针穿刺样品的2-苯氧乙醇含量、蛋白质含量、渗透压摩尔浓度及Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型病毒D抗原含量的相对变化率,应用SPSS 20软件对各项指标的相对变化率进行单因素方差分析,评价多次穿刺对sIPV质量的影响。结果 sIPV穿刺前后样品的各项检测结果均符合企业注册标准。每针穿刺样品间2-苯氧乙醇含量、蛋白质含量、Ⅱ、Ⅲ型病毒D抗原含量的相对变化率差异均无统计学意义(F分别为2.125、1.155、1.137、1.882,P分别为0.152、0.386、0.393、0.190);渗透压摩尔浓度及Ⅰ型病毒D抗原含量的相对变化率差异有统计学意义(F分别为4.750和4.010,P分别为0.021和0.034)。Duncan检验结果显示,与第1针比较,第2、3针穿刺样品的渗透压摩尔浓度相对变化率差异不显著,第4针差异显著,第5针又相对稳定;第1、2、4和5针穿刺样品间Ⅰ型病毒D抗原含量的相对变化率差异不显著,第3针与其他4针间存在显著差异。结论 28 d内5次穿刺对5剂量西林瓶包装sIPV的质量无影响。

关键词： 脊髓灰质炎病毒   免疫缺陷   口服脊灰减毒活疫苗  

摘要： 分析江西一例免疫缺陷患者体内连续采集的15份粪便标本中分离到的Ⅲ型脊髓灰质炎病毒的全长VP1区基因特征。将从15份标本中分离到的14株Ⅲ型iVDPVs进行噬斑纯化,每个病毒随机挑取10个噬斑,接着进行逆转录‐聚合酶链反应扩增,测定获取到的154株iVDPVs全长VP1区序列。通过系统发育分析和BEAST程序探究iVDPV病毒的进化特征,估算其进化速率和口服脊灰减毒活疫苗(attenuated oral polio vaccine,OPV)初始感染时间。14株iVDPVs与Ⅲ型脊髓灰质炎减毒疫苗株(Sabin Ⅲ)核苷酸和氨基酸同源性分别为97.8%~98.7%和97.6%~98.3%。相较于Sabin Ⅲ,14株iVDPVs VP1区第54位氨基酸发生了A→V的突变,这可能导致温度敏感表型和衰减表型的改变。根据拓扑结构系统发育树被划分为3个Lineages,其中17049‐1‐8,17049‐2‐2和17049‐2‐9分别属于Lineage 1和Lineage 2,其余属于Lineage 3。具有Lineage 3序列特征的克隆是优势克隆,呈现出随时间持续分化的特征。BEAST程序估算的14株iVDPVs全长VP1区核苷酸平均进化速率为9.29×10‐3/位点/年(95%置信区间:2.81×10‐3‐1.59×10‐2),OPV初始感染时间为2012年11月18日。MCC树(maximum clade credibility tree)显示前4个遗传分支的分化仅用了40 d。14株Ⅲ型iVDPVs具有高度相关性,它们感染患儿后进化非常迅速,在慢性感染的早期便开始了谱系的分化。突变的不断积累和关键位点的改变可以引起iVDPVs神经毒力的变化,导致患儿出现AFP症状。iVDPV病例持续的排毒给脊灰根除目标的实现带来了巨大挑战,在脊髓灰质炎消灭的最后阶段及时调整免疫策略,继续维持较高的免疫覆盖率,保持iVDPV监测的灵敏性显得十分重要。

关键词： 脊髓灰质炎疫苗   顾方舟   脊髓灰质炎减毒活疫苗   脊髓灰质炎病毒   脊灰   脊髓灰质炎活疫苗   科技攻关   医学科学家  

摘要： 顾方舟(1926年6月-2019年1月),著名医学科学家、病毒学家。长期从事脊髓灰质炎减毒活疫苗研究,建立了脊髓灰质炎病毒的分离与定型方法,制定了脊髓灰质炎活疫苗的试制与安全性标准。我国脊髓灰质炎疫苗研发生产的拓荒者、科技攻关的先驱者。

关键词： 二价脊髓灰质炎减毒活疫苗   耗损系数   调查分析  

摘要： 目的 了解北京市石景山区口服二价脊髓灰质炎减毒活疫苗(bOPV)接种现况,通过分析计算bOPV的损耗系数,了解其损耗程度,为制定科学的疫苗使用计划,提高疫苗使用效率提供依据。方法 利用北京市疾控系统疫苗采购进销存管理系统及北京市石景山区生物制品报表,收集石景山区辖区内2021年各预防接种门诊bOPV的接种数据,采用SPSS21.0软件进行分析,率的比较采用χ^(2)检验,以P<0.05为差异有统计学意义。结果 北京市石景山区2021年18家预防接种门诊bOPV共使用5 280剂次,接种2 085剂次,耗损系数为2.53,接种门诊最低耗损系数为1.59,最高为10.00。卫健委直属门诊(2.18)、企事业单位直属(2.61)、军队自管门诊(3.20)和学校直属门诊(3.87),bOPV接种情况差异有统计学意义(P=0.020);A级规范化门诊(4.80)、AA级规范化门诊(2.27)和AAA级规范化门诊(3.55),bOPV接种情况差异有统计学意义(P=0.002);接种周期1次/周(3.27)、2次/周(4.01)、3次/周(3.40)和4次/周(2.03),bOPV接种情况差异有统计学意义(P=0.002);接种量不同门诊、滴管使用情况不同门诊、bOPV废弃时间不同门诊bOPV接种情况差异无统计学意义(P均>0.05)。结论 北京市石景山区bOPV损耗较高,建议各接种门诊安排bOPV固定接种日,增加bOPV的日接种量,提高bOPV使用效率,同时建议引入小包装剂次疫苗,减少不必要浪费。