关键词： Capsids   Antigens   Enzyme-linked immunoassays   Poliovirus   Poliomyelitis   Vaccines   Microbial mutation   Insertion mutation  

摘要： While wild type polio has been nearly eradicated there will be a need to continue immunisation programmes for some time because of the possibility of re-emergence and the existence of long term excreters of poliovirus. All vaccines in current use depend on growth of virus and most of the non-replicating (inactivated) vaccines involve wild type viruses known to cause poliomyelitis. The attenuated vaccine strains involved in the eradication programme have been used to develop new inactivated vaccines as production is thought safer. However it is known that the Sabin vaccine strains are genetically unstable and can revert to a virulent transmissible form. A possible solution to the need for virus growth would be to generate empty viral capsids by recombinant technology, but hitherto such particles are so unstable as to be unusable. We report here the genetic manipulation of the virus to generate stable empty capsids for all three serotypes. The particles are shown to be extremely stable and to generate high levels of protective antibodies in animal models.

关键词： Polio immunization   Budget impact   Polio eradication   OPV   IPV  

摘要： Objectives: To conduct a budget impact analysis (BIA) of introducing the immunization recommendations of India Expert Advisory Group (IEAG) for the years 2015-2017. The recommendations include introduction of one inactivated poliomyelitis vaccine (IPV) dose in the regular child immunization programme along with reductions in oral polio vaccine (OPV) doses in supplemental programmes. Study design: This is a national level analysis of budget impact of new polio immunization recommendations. Since the states of India vary widely in terms of size, vaccine coverage and supplemental vaccine needs, the study estimated the budget impact for each of the states of India separately to derive the national level budget impact. Methods: Based on the recommendations of IEAG, the BIA assumes that all children in India will get an IPV dose at 14 weeks of age in addition to the OPV and DPT (or Pentavalent-3) doses. Cost of introducing the IPV dose was estimated by considering vaccine price and vaccine delivery and administration costs. The cost savings associated with the reduction in number of doses of OPV in supplemental immunization were also estimated. The analysis used India-specific or international cost parameters to estimate the budget impact. Results: Introduction of one IPV dose will increase the cost of vaccines in the regular immunization programme from $20 million to $47 million. Since IEAG recommends lower intensity of supplemental OPV vaccination, polio vaccine cost of supplemental programme is expected to decline from $72 million to $53 million. Cost of administering polio vaccines will also decline from $124 million to $105 million mainly due to the significantly lower intensity of supplemental polio vaccination. The net effect of adopting IEAG's recommendations on polio immunization turns out to be cost saving for India, reducing total polio immunization cost by $6 million. Additional savings could be achieved if India adopts the new policy regarding the handling of

关键词： 脑性瘫痪   ICF   缺血半暗区   中国康复理论与实践   脑卒中后   脑卒中偏瘫患者   孤独症儿童   表面肌电   脊髓灰质炎后综合征   手功能障碍  

摘要： ~~

关键词： 脊髓灰质炎病毒   小儿麻痹病毒   肠道病毒   减毒   毒力   毒性   OPV   疫苗   菌苗  

摘要： 脊髓灰质炎(polio,也称作小儿麻痹症)几乎被根除了。目前,大多数脊髓灰质炎爆发风险并不是来自于野外的脊髓灰质炎病毒(poliovirus),而是来自于由减毒脊髓灰质炎病毒组成的口服疫苗。这些病毒积累突变,从而允许它们在未充分接种的人群中传播,重新获得毒力,甚至导致疾病爆发。目前,根据一项新的研究,研究人员绘制出脊髓灰质炎病毒发生的一系列突变,这可能解

关键词： 国产脊髓灰质炎灭活疫苗(Sabin株)   免疫效果   安全性  

摘要： 目的:对我国国产脊髓灰质炎灭活疫苗和口服脊髓灰质炎减毒活疫苗序贯接种基础免疫的免疫效果和国产脊髓灰质炎灭活疫苗接种后的安全性进行评价,为我国脊髓灰质炎疫苗免疫策略的调整提供依据。第一部分国产脊髓灰质炎疫苗序贯接种基础免疫效果评价方法:采用同期非随机对照实验研究方法,于2015年9月12月期间,在宁夏同心县选择满2月龄健康儿童180人。按照国家规定的免疫程序,分别在2、3、4月龄分别接种1剂次脊髓灰质炎疫苗。以上儿童分为两组,一组儿童采用tOPV+tOPV+tOPV的基础免疫程序（简称O-O-O组）,另一组儿童采用国产IPV（Sabin株）+tOPV+tOPV（简称I-O-O组）序贯接种的基础免疫程序。分别采集同一受种者免疫前和接种第1或2或3剂次脊髓灰质炎疫苗后30天的血清标本,采用微量中和试验测定其血清中3个脊髓灰质炎型别（Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型）病毒的抗体滴度,计算GMT、抗体阳转率和保护率。结果:1.两组儿童免疫后3种型别脊髓灰质炎病毒抗体滴度与免疫前相比,差异均有统计学意义（P﹤0.05）,免疫之后3种型别病毒抗体滴度均高于免疫之前。2.I-O-O组与O-O-O组相比,接种1剂次疫苗后,国产IPV（Sabin株）组中Ⅱ、Ⅲ型病毒抗体滴度低于接种tOPV组,差异有统计学意义（P﹤0.05）;接种两剂次疫苗后,两组间Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型脊髓灰质炎病毒抗体滴度差异无统计学意义（P﹥0.05）;接种3剂次疫苗后,I-O-O组Ⅱ、Ⅲ型病毒抗体滴度高于O-O-O组,差异有统计学意义（P﹤0.05）。3.I-O-O组与O-O-O组相比,接种1剂次疫苗后,国产IPV（Sabin株）组中Ⅱ、Ⅲ型脊髓灰质炎病毒抗体阳转率低于tOPV组;接种两剂次疫苗后,国产IPV（Sabin株）+tOPV组脊髓灰质炎Ⅱ型病毒抗体阳转率低于tOPV+tOPV组;接种3剂次疫苗后,两组之间脊髓灰质炎Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型病毒抗体阳转率均在89%以上,差异均无统计学意义（P﹥0.05）。4.I-O-O组与O-O-O组相比,完成3剂次脊髓灰质炎疫苗的基础免疫后,3种型别脊髓灰质炎病毒抗体保护率均在96%以上,两组之间差异均无统计学意义（P﹥0.05）。结论:3剂次脊髓灰质炎疫苗基础免疫程序接种完成后,I-O-O组脊髓灰质炎Ⅱ型、Ⅲ型病毒抗体滴度均高于O-O-O组;两组均取得较好的针对3种型别脊髓灰质炎病毒的抗体阳转率和保护率,差异无统计学意义;国产IPV（Sabin株）和tOPV的序贯接种的免疫程序能够提供与全程接种tOPV相似甚至更高的针对脊髓灰质炎病毒的免疫保护能力,能有效的建立人群免疫屏障,阻断病毒的传播。第二部分国产脊髓灰质炎灭活疫苗（Sabin株）接种后的安全性评价方法:采用主动监测与被动监测相结合的方法,评价疫苗接种后的安全性。主动监测:于2015年9月至2016年2月期间,对同心县所有接种国产IPV（Sabin株）和tOPV的儿童,在接种疫苗后的特定时间进行入户调查或者电话随访,调查其接种疫苗后不良反应的发生情况。被动监测:从中国疫苗规划信息管理系统查询2008年2016年宁夏全区国产IPV（Sabin株）、tOPV及其他免疫规划疫苗的接种数据及不良反应发生数据,对其进行比较分析。结果:1.主动监测结果显示接种国产IPV（Sabin株）后,一般反应发生率为246.4/万,接种tOPV后一般反应发生率为64.92/10万,虽然国产IPV（Sabin株）的一般反应发生率高于tOPV,但无严重异常反应发生。2.被动监测结果显示接种国产IPV（Sabin株）后,一般反应发生率为51.68/10万,异常反应发生率为1.67/10万;接种tOPV后一般反应发生率为1.73/10万,异常反应发生率为0.22/10万,均低于接种国产IPV（Sabin株）后的不良反应发生率。3.与其他免疫规划疫苗相比,虽然接种国产IPV（Sabin株）后一般反应的发生率在宁夏全区居第一位（51.68/10万）,但其异常反应发生率（1.67/10万）低于麻疹疫苗（8.97/10万）、白破疫苗（5.26/10万）、麻腮风联合减毒活疫苗（2.52/10万）、麻风减毒活疫苗（2.13/10万）和卡介苗（1.81/10万）,且无严重的异常反应发生。结论:AEFI主动监测的敏感性高于被动监测,接种国产IPV（Sabin株）后无严重异常反应发生,是国家免疫规划疫苗中比较安全的疫苗之一。

关键词： 脊髓灰质炎疫苗   基础免疫   接种行为   免疫规划  

摘要： 目的了解首剂脊髓灰质炎灭活疫苗(IPV)纳入免疫规划(EPI)前宁波市鄞州区儿童脊髓灰质炎疫苗(PV)接种情况。方法通过宁波市免疫规划信息管理系统收集2011—2014年出生,且全程完成PV基础免疫的儿童接种资料,对首针PV(PV1)和基础免疫程序构成情况做描述性统计分析。结果鄞州区儿童基础免疫全程接种率为99.91%。儿童PV1以脊灰减毒活疫苗(OPV)为主,占72.11%,IPV与吸附无细胞百白破、灭活脊髓灰质炎和b型流感嗜血杆菌(结合)联合疫苗(DTa P-IPV/Hib)分别占16.30%和11.59%。基础免疫程序以OPV全程(O-O-O型)为主,占71.85%,替代程序以IPV全程(I-I-I型)和DTa P-IPV/Hib全程(D-D-D型)为主,分别占15.05%和11.50%。不同户籍、地区、出生年份及经济水平儿童的PV1采用疫苗和基础免疫程序构成均有所不同(P<0.01)。出生年份越晚的儿童,PV1采用OPV的比例越低,采用IPV和DTa PIPV/Hib的比例相对越高;基础免疫采用O-O-O型的比例越低,采用I-I-I型和D-D-D型的比例相对越高(均P<0.01)。结论鄞州区儿童PV基础免疫全程接种率高,PV1和基础免疫全程接种灭活类脊灰疫苗比例呈逐年增高趋势,在首剂IPV纳入EPI前已具备一定工作基础,但应注意人群和地区差异。

关键词： 脊髓灰质炎病毒   血清   Vero细胞   病毒感染性滴度   D抗原   中和抗体  

摘要： 脊髓灰质炎(简称脊灰)是由脊髓灰质炎病毒引起,主要通过粪-口途径传播的急性传染病,俗称小儿麻痹症。疫苗是预防该疾病的有效手段。血清支持细胞的生长和繁殖能力是细胞培养过程中评价血清质量最主要的指标之一,它的选择对细胞和病毒的培养具有十分重要的意义。疫苗的免疫效果与病毒含量密切相关,所以准确测定其含量是疫苗有效性的保证。目前,使用血清试剂对脊髓灰质炎病毒培养及检测结果可能存在的影响是不容忽视的。且市面上不同来源不同厂家的血清在质量上存在批间差异,增加了疫苗生产和检定的不稳定性和疫苗质量控制的难度。目的:研究血清对脊髓灰质病毒培养及脊髓灰质炎病毒感染性滴度检测的影响。方法:(1)用不同血清适应Vero细胞培养后,以三种M.O.I接种脊髓灰质炎病毒并收获病毒,采用微量滴定法测定病毒收获液感染性滴度,采用ELISA法检测收获液D抗原,分析不同血清培养对脊髓灰质炎病毒培养的影响。(2)采用6种未处理血清和6种预处理血清组(免疫吸附法)进行脊髓灰质炎病毒感染性滴度检测,检测了不同组血清中脊髓灰质炎病毒中和抗体效价,并使用处理血清组进行促细胞生长试验,分析不同血清对感染性滴度的影响。结果:(l)不同血清培养Vero细胞,细胞形态相似,细胞计数结果差异不显著(P>0.05),倍增时间差异不明显(P>0.05),病毒滴度差异不显著(P＞0.05),D抗原检测结果,Ⅰ型、Ⅲ型进口胎牛血清优于进口新生牛血清、进口小牛血清和国产新生牛血清,差异显著(P<0.05);Ⅱ型差异不显著(P＞0.05)。相同血清不同M.O.i接种脊髓灰质病毒,病毒滴度和D抗原含量无影响,只是影响病毒病变时间快慢。(2)6种未处理血清组病毒感染性滴度检测结果差异显著(P<0.01),6种处理血清组病毒感染性滴度差异不显著(P>0.05)。未处理组2号血清的中和抗体效价为1:4,6号血清的中和抗体效价为1:8,其余各组血清的中和抗体效价均＜1:4。6种处理血清组的中和抗体效价均为1:2。血清促细胞生长试验显示6种处理组血清细胞生长趋势正常。结论:(1)不同血清培养细胞会影响之后培养病毒的质量和产量,提示可优化培养条件,改进增加细胞密度的可能,更有效的利用生物反应器生产SabinIPV。(2)比较6种不同血清对脊髓灰质炎病毒感染性滴度(CCID50)检测结果的影响。脊髓灰质炎病毒感染性滴度检测前使用免疫吸附对血清进行预处理,可降低血清中存在的中和抗体对检测的影响,为比较不同实验室数据提供可能。

关键词： 脊髓灰质炎疫苗   院内感染   防控措施  

摘要： 目的探讨bOPV管理和接种过程中院内感染的预防及控制措施。方法从疫苗管理、滴管选择、操作规范、环境、医务人员、接种过程、医疗废物处理等方面详细论述院内感染的防控措施。结果医院预防接种门诊自5月1日开始接种bOPV以来没有发生1例院内感染。结论规范bOPV喂服的方法,严格掌握禁忌症,切实做好院内感染各项预防及控制环节,杜绝院内感染的发生,保证疫苗接种的成功率。

关键词： 脊髓灰质炎   灭活疫苗   皮内免疫   安全性  

摘要： 全球合作消灭脊髓灰质炎（以下简称“脊灰”）取得了重要进展，野毒株(WPV)仅在巴基斯坦、阿富汗两个国家流行，脊灰有望成为继全球消灭天花后第二个被消灭的病毒性传染病。全球消灭脊灰后，由于口服脊髓灰质炎减毒活疫苗(Oral Polio Vaccine，OPV)可引起疫苗相关病例（Vaccine-Associated Paralytic Poliomyelitis，VAPP）和疫苗衍生株病例(Vaccine-Derived Poliovirus，VDPV)，将被停止使用，必须采用脊灰灭活疫苗（Inactivated Polio Vaccine，IPV）来维持无脊灰状态。减毒株（Sabin株）生产的脊髓灰质炎灭活疫苗(Inactivated Polio Vaccine，Sabin strain，sIPV)，因其生物安全性高，适合在全球尤其第三世界国家推广使用。　　因sIPV疫苗抗原用量是OPV的100至300倍，难于生产足够疫苗供全球使用。皮内具有丰富的朗格汉斯细胞(LC)和树突状细胞(DC)，皮内免疫可以增强抗原的免疫应答。本研究以我所已经上市的sIPV疫苗全剂量肌肉免疫作为对照，采用有针和无针注射器进行1/10，1/5，1/3剂量皮内免疫途径的比较研究，并观察了1剂sIPV诱导的致敏反应(priming)、皮内免疫持久性以及免疫记忆性。结果表明:1）Wistar大鼠3剂免疫后1/5及1/3剂量皮内免疫效果良好，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型抗体阳转率与全剂量肌肉免疫相当(P＞0.05)，且均达到了100％，各型别抗体几何平均滴度(GMT)1/5剂量组均高于1∶148.67，1/3剂量组均高于1∶381.09，两组GMT均远高于保护滴度1∶8。版纳小耳猪3剂基础免疫后，1/5及1/3剂量无针皮内免疫效果良好，各型别抗体阳转率与全剂量肌肉免疫没有统计学上的显著差异(P＞0.05)，除了Ⅱ型1/5剂量组为80％外，其余各型均达到了100％，1/5剂量组各型别的GMT高于1∶78.58，1/3剂量组高于1∶80.36。2）豚鼠及小型猪动物模型全身过敏反应试验及刺激性试验结果表明无针注射皮内免疫途径具有良好的安全性。3）大鼠基础免疫后12个月，1/5及1/3剂量无针皮内免疫组各型别抗体阳转率维持在80％以上，抗体水平维持在11.12以上;加强免疫30天后，1/5剂量、1/3剂量无针皮内免疫组抗体阳转率均达到100％，GMT显著升高，分别高于1∶509.35、1∶827.43。版纳小耳猪基础免疫后6个月，1/5及1/3剂量无针皮内免疫途径各型别抗体阳转率维持在80％以上，抗体水平维持在29.20以上;加强免疫30天后，抗体阳转率均达到100％，GMT显著升高，1/5剂量高于1∶1723.3，1/3剂量高于1∶1536.9。4）大鼠及版纳小耳猪第2剂sIPV免疫后7天1/10、1/5、1/3剂量皮内免疫组以及全剂量肌肉免疫组抗体水平均显著增长8-40倍，即均能够诱导priming免疫应答反应。进一步研究发现大鼠及版纳小耳猪1/5、1/3剂量sIPV无针皮内免疫能够产生免疫记忆性，辅助性T细胞(CD3+CD4+)数量较生理盐水对照组高13-15倍，活化T细胞(CD4+INF-γ+)、（CD8+INF-γ+）分别较对照组高2.9、1.9倍，记忆T细胞(CD3+CD161+)较对照组高1.6-1.7倍，记忆性B细胞（CD3-CD21+）数量较对照组高2.6-4倍，加强免疫后能够快速诱导产生较高的中和抗体水平，提示1/5及1/3剂量sIPV无针皮内免疫途径具有较好的免疫记忆性，加免后诱导的免疫效果显著。　　综上所述，笔者完成了sIPV皮内免疫分部剂量的安全性及免疫原性的临床前研究，表明1/5剂量sIPV皮内免疫在动物模型中具有良好的安全性及免疫原性，皮内免疫途径降低sIPV的抗原使用量是可行的。

关键词： 脊灰病毒   层析纯化   凝胶过滤   离子交换  

摘要： 脊髓灰质炎(Poliomyelitis,以下简称脊灰)是由脊灰病毒(Poliomyelitis Virus,PV)感染引起、危害极大的急性传染病,尚无有效治疗方法,只能通过疫苗预防。口服脊灰减毒活疫苗(Oral Poliomyelitis Vaccine,OPV)因接种方便,成本相对较低而一度被广泛使用,但可能引起疫苗相关麻痹病例(Vaccine-Associated Paralytic Poliomyelitis,VAPP)和疫苗衍生株脊灰病毒(Vaccine-Derived Poliovirus,VDPV),灭活脊灰疫苗(Inactivated Poliomyelitis Vaccine,IPV)能有效避免 VAPP 和 VDPV,采用IPV取代OPV是《全球消灭脊灰战略终结计划》的要求。而在全世界消灭脊灰后,采用野毒株(Salk株)生产IPV对生物安全水平要求更加严格,因此WHO鼓励疫苗厂家研发Sabin株脊灰灭活疫苗(Inactivated Poliomyelitis Vaccine,Sabin strain,sEPV)。按我所现行sIPV生产工艺,病毒培养后进行病毒液收获、过滤澄清、超滤浓缩,获得的病毒浓缩液以Sepharose CL-6B凝胶和DEAE Sepharose FF离子交换填料进行纯化。当前我所纯化工序所用时间较长,为满足后续工艺规模,我们需要选择更高效和快速的凝胶介质。本研究通过按3%和6%两种柱体积上样量,依次对Sepharose CL-6B和Sepharose 6FF两种不同的凝胶填料进行脊髓灰质炎病毒的纯化比较,并完成后续的DEAE Sepharose FF离子交换层析。通过结果的比较分析,验证两种凝胶过滤填料对脊髓灰质炎病毒的纯化效果的影响,为改进sIPV生产工艺提供相应的数据支持。目的比较两种不同的凝胶过滤介质层析对Sabin株脊髓灰质炎病毒的分离纯化效果。方法将Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型Sabin株脊髓灰质炎病毒收获液各3批经超滤浓缩后,分别采用Sepharose CL-6B和Sepharose 6FF填料进行凝胶过滤纯化,分段收集各纯化峰,检测D抗原及蛋白含量,计算比活性、蛋白去除率及抗原回收率,确定病毒峰收集范围。然后,进一步利用DEAE Sepharose FF离子交换填料对凝胶层析纯化液进行纯化后,检测Vero细胞DNA、Vero细胞蛋白、牛血清白蛋白、卡那霉素等残留含量。结果Sepharose 6FF填料按6%柱体积上样进行凝胶纯化,纯化的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型病毒收获液抗原回收率均值分别为78.69%、78.03%和78.37%,与Sepharose CL-6B填料按3%柱体积上样(77.29%、78.60%和77.36%)相比,差异无统计学意义(P>0.05)。两种填料纯化的各型收获液再经离子交换纯化后,蛋白去除率、比活性、Vero细胞DNA残留量、Vero细胞蛋白残留量、牛血清白蛋白残留量、卡那霉素残留量检测结果均符合《中国药典》三部(2015版)相关要求,两种填料纯化的各型收获液比活性差异无统计学意义(P>0.05)。结论使用Sepharose6FF纯化的各型病毒纯化液抗原回收率和比活性与Sepharose CL-6B无明显差异,但Sepharose6FF可以增加上样量,从而减少层析纯化次数,大幅提高纯化效率,可用Sepharose6FF替代SepharoseCL-6B纯化脊灰病毒。