关键词： 小儿脊髓灰质炎   疫苗接种   异常反应   护理策略  

摘要： 探寻小儿脊髓灰质炎疫苗接种后发生异常反应的护理干预策略及其效果。方法 在2021年10月至2024年10月期间,本次研究共选取了50名患有脊髓灰质炎疫苗接种异常反应的患儿作为研究对象。将这50名患儿均等划分为两个组别,对照组(共计25名)和研究组(同样25名)。其中,对照组接受的是标准的护理方式,而研究组则额外实施了全面的护理干预措施。结果 从症状改善时间、不良反应发生率、患儿舒适度评分、家属满意度及护理依从性等方面来看,研究组的表现都比对照组要好(P<0.05)。结论 对脊髓灰质炎疫苗接种异常反应患儿实施综合护理干预,能有效缩短症状改善时间,减少不良反应,让家长更为满意。

关键词： 脊髓灰质炎   脊髓灰质炎疫苗   预防接种   脊髓灰质炎病毒   中和抗体  

摘要： 目的了解福建省儿童脊髓灰质炎(脊灰)疫苗接种和人群脊灰病毒(Poliovirus,PV)中和抗体水平。方法在福建省9个地市选取2月龄~16岁儿童开展脊灰疫苗接种调查,分析不同免疫策略时期出生儿童接种比例;选取2月龄~80岁、2月龄~11岁人群分别检测血清Ⅰ型/Ⅲ型、Ⅱ型中和抗体,分析阳性率和几何平均滴度(Geometric mean titer,GMT)。结果2月龄~16岁儿童有脊灰疫苗接种史比例为94.02%(2359/2509),其中≥3剂接种比例为96.65%(2280/2359);2016年5月-2019年12月、2020年1月-2023年1月出生队列有脊灰疫苗接种史比例分别为97.72%(901/922)、98.20%(873/889),其中≥3剂接种比例分别为97.89%、94.04%,≥2剂脊灰灭活疫苗(Inactivated poliovirus vaccine,IPV)接种比例分别为66.10%、99.27%。2月龄~80岁人群Ⅰ型、Ⅲ型PV抗体阳性率分别为97.62%(863/884)、95.14%(841/884),GMT(1∶)分别为273.43、177.92。2月龄~11岁儿童Ⅱ型PV抗体阳性率为97.28%(322/331),GMT(1∶)为91.43。结论2023年福建省儿童脊灰疫苗接种和人群Ⅰ/Ⅲ型PV抗体均处于高水平,儿童≥2剂IPV接种比例和Ⅱ型PV抗体水平显著提升。

关键词： 2-苯氧乙醇   Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗   气相色谱法  

摘要： 目的建立用于检测Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(Sabin inactivated poliovirus vaccine,sIPV)(Vero细胞)中2-苯氧乙醇含量的气相色谱法(gas chromatography,GC),并进行验证,以期为生物制品中2-苯氧乙醇含量的检测提供可靠的方法。方法采用聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)GC柱(30 m×0.25 mm×0.25μm)进行2-苯氧乙醇含量检测。色谱条件:载气为氮气,进样量为1μL,分流比为1∶10,载气流速为1 mL/min;程序升温:起始柱温为90℃,以每分钟10℃的速率升温至220℃,维持10 min,采用火焰离子化检测器(flame ionization detector,FID)采集信号。验证方法的线性范围、重复性、准确性及专属性。分别采用建立的方法及高效液相色谱法(high performance liquid chro-matography,HPLC)检测3批sIPV(Vero细胞)中2-苯氧乙醇含量,并进行比较。结果对照品溶液在0.2~1.0 mg/mL浓度范围内,与峰面积呈良好的线性关系,线性方程为:y=4021.44 x+97.07,R2=0.998;6份供试品溶液中2-苯氧乙醇含量RSD<2.0%;9份供试品的高、中、低浓度加样回收率均在90%110%范围内;对照品及供试品溶液均于9.1 min处可见2-苯氧乙醇色谱峰,阴性样品未见该色谱峰,对供试品无干扰。GC及HPLC法检测3批供试品中2-苯氧乙醇含量均值分别为(4.990±0.175)和(4.986±0.122)mg/mL,差异无统计学意义(t=0.0456,P=0.9678)。结论建立的GC法具有良好的重复性、准确性及专属性,有望成为替代HPLC的新方法。

关键词： 离子色谱法   脊髓灰质炎灭活疫苗   多离子  

摘要： 目的采用离子色谱法测定脊髓灰质炎灭活疫苗(inactivated poliomyelitis vaccine,IPV)中的多离子含量,并对方法进行验证及初步应用,以期对疫苗中的多离子实行质量控制。方法色谱条件:采用阴离子交换分析柱(4 mm×250 mm),上样量:25μL,用30 mmol/L KOH淋洗液等度洗脱,流速:1.0 mL/min,柱温:25℃,电导检测器检测,检测时间:15 min,用Chromeleon色谱工作站记录并分析数据。对建立的方法进行系统适用性、专属性、线性、准确性、重复性验证,并确定该方法的最低检出限和最小定量限。采用建立的方法检测10批Sabin株IPV(sIPV)。结果连续进样8次,氟离子、氯离子、硫酸根离子、硝酸根离子、磷酸根离子峰面积相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)均小于2.0%;该方法检测氯离子、氟离子、硝酸根离子、磷酸根离子、硫酸根离子专属性较强;在2.5~150μg/mL范围内,上述离子与色谱峰面积呈良好的线性关系,r^(2)均大于0.995;向sIPV滤出液中分别添加低(10μg/mL)、中(25μg/mL)、高(50μg/mL)浓度的多离子混标溶液,重复测定6次的回收率在93.69%~106.70%之间,RSD在0.05%~0.7%之间;氟离子、氯离子、硫酸根离子、硝酸根离子、磷酸根离子的最低检出限分别为8.3、2.5、5.1、0.025、0.021μg/mL,最小定量限分别为0.025、8.3、0.025、0.45、0.063μg/mL。采用建立的方法在10批sIPV中均未检出氟离子、硫酸根离子和硝酸根离子,但检出了氯离子和磷酸根离子。结论离子色谱法测定IPV中多离子浓度变化简便、快捷、灵敏、重现性好,是一种有效的检测手段,可帮助企业内控该种疫苗的质量。

关键词： 病毒灭活   验证   检测限   细胞敏感度   精密度   应用性  

摘要： 目的建立Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(Vero细胞)病毒灭活验证方法,并进行方法学验证。方法将Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型脊髓灰质炎病毒进行系列梯度稀释,分别接种于Vero细胞,进行2次盲传扩增,观察细胞病变情况。对该方法的最低检测限及细胞对病毒的敏感度进行摸索,并对该方法的精密度(重复性和中间精密度)和适用性进行验证。结果建立的病毒灭活验证方法对Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型脊髓灰质炎病毒的检测限分别为-2、-1、0 lgCCID_(50)/mL。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型脊髓灰质炎病毒对Vero细胞的最小接种浓度均为2 lgCCID_(50)/mL,在第7天均可观察到Vero细胞病变,即该细胞的敏感度为2 lgCCID_(50)/mL。同一检验人员重复检测同一批样品6次结果一致;2名检验人员在不同时间重复检测同一批样品6次结果一致;样品在-70℃及以下存放7 d与未冻存的样品检验结果一致;分别对生产过程中产生的Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(Vero细胞)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型单价灭活病毒液及原液各3批进行病毒灭活验证,取样当天和在-70℃及以下存放7 d后检验的样品的灭活验证检验结果一致,表明该方法的精密度和适用性均较好。结论Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(Vero细胞)病毒灭活验证方法能有效检测样品的灭活状态,可用于对病毒灭活效果的评价及工艺过程中对中间品等关键步骤的监控。

关键词： 脊髓灰质炎病毒疫苗,灭活   无酚红培养基   制剂   贮存效期  

摘要： 目的验证无酚红M199培养基的贮存效期,同时探索无酚红M199效期对无酚红Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(inactivated Sabin strain poliovirus vaccine,sIPV)关键质量属性的影响。方法对贮存0、6、12、18、24、30、36及42个月的3批次无酚红M199干粉培养基进行外观、澄清度、pH、干燥失重、细菌内毒素、微生物限度等物理化学性质及微生物性质长期监测;检测用贮存36个月并检定合格的无酚红M199制备的sIPV成品关键质量属性;将近效期和远效期无酚红M199制备的各3批sIPV分别贮存于37℃和25℃进行稳定性监测,检测D抗原含量,评价其稳定性;用2组sIPV免疫大鼠,检测大鼠血清抗体效价,评价其免疫原性。结果无酚红M199干粉培养基于2~8℃贮存42个月后的外观、澄清度、pH、干燥失重、细菌内毒素、微生物限度等均合格;用贮存36个月无酚红M199所制备sIPV成品的pH、D抗原、蛋白含量、Vero细胞DNA残留量、牛血清白蛋白残留量、Vero细胞蛋白残留量、游离甲醛含量等各项检定结果均符合中国药典2020年版三部和企业标准要求;用贮存36个月无酚红M199制备的sIPV效价合格、稳定性良好且与远效期无酚红sIPV免疫原性趋势一致,效力(t=-0.15~2.17,P>0.05)和诱导中和抗体水平(t=-1.46~2.02,P>0.05)差异均无统计学意义。结论用贮存至36个月的无酚红M199制备的sIPV成品稳定性较好,近效期和远效期无酚红M199制备的sIPV产品质量属性、免疫原性及稳定性趋势一致,且对产品质量无影响,无酚红培养基的效期初步可定为36个月。

关键词： 急性弛缓性麻痹   疫苗衍生脊髓灰质炎病毒   血友病   流行病学调查  

摘要： 2021年4月,浙江省1例急性弛缓性麻痹(AFP)男婴在上海市复旦大学附属儿科医院治疗期间采集的2份粪便标本检出Ⅰ型疫苗衍生脊髓灰质炎(脊灰)病毒(VDPV),VP1区核苷酸变异数分别为12和14个。病例有3剂次脊灰疫苗免疫史,入院时右下肢近端肌力Ⅲ级,远端Ⅱ级。经对症治疗后,右下肢活动明显好转,肌力基本恢复,予以出院。病例后续采集的第8~12份粪便标本未再检出VDPV;密切接触者粪便标本也未检出VDPV,病例居住地县区各医疗机构、居住地周围及邻近村和乡镇未发现类似病例。由于病例未出现VDPV所致脊灰的相关临床症状,专家小组结合流行病学调查结果、实验室检测结果及脊灰疫苗免疫史等排除脊灰,诊断为血友病A型。本次事件跨省(市)协作,处置及时,未造成病毒进一步传播。提示应保持AFP病例监测系统的敏感性,增加环境监测手段,提高脊灰疫苗接种率,防止病毒传播扩散。

关键词： 高效液相色谱法   脊髓灰质炎灭活疫苗   甲醛   含量测定  

摘要： 目的建立Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(Vero细胞)中游离甲醛含量柱前衍生-高效液相色谱检测方法,并进行验证及应用,以期为测定疫苗中游离甲醛含量提供新的方法。方法样品用2,4-二硝基苯肼衍生后,经C18色谱柱(5μm,120?,4.6 mm×250 mm)分离,分别对检测波长、流动相比例、流速、衍生时间、温度、缓冲液和衍生容器等检测条件进行优化,并对方法进行专属性、线性、重复性、准确性、检测限和定量限、耐用性验证。采用优化的方法检测20批脊髓灰质炎灭活疫苗(Vero细胞)中游离甲醛含量。结果色谱条件:以乙腈∶水体积分数70∶30为流动相,流速0.6 mL/min,波长352 nm进行测定;衍生条件:加入2,4-二硝基苯肼乙腈溶液0.5 mL和pH 5.0的缓冲液0.25 mL,60℃水浴20 min。该色谱分离条件能够有效分离2,4-二硝基苯肼及甲醛衍生物,且乙醛对测定结果无影响;甲醛标准品浓度在0.05~100μg/mL范围内与峰面积线性关系良好,r为0.9999;重复性试验中6次检测结果的相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为0.36%;9份加标供试品溶液甲醛含量回收率在102.0%~107.0%之间;检出限和定量限分别为0.025和0.05μg/mL;样品衍生后48 h能够稳定存在,耐用性较好。同一批次样品结果重复性较好,甲醛含量在4.5~9.9μg/剂之间。结论建立的方法具有测定范围宽、线性好、准确性高等优点,能够对Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(Vero细胞)中游离甲醛进行准确定量,可作为疫苗产品游离甲醛含量的辅助检测方法,对疫苗批签发和质量监管具有重要意义。

关键词： 表面等离子共振   脊髓灰质炎灭活疫苗   D抗原  

摘要： 目的 建立Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗（Sabin strain inactivated polio vaccine,sIPV）单价原液D抗原含量表面等离子共振（surface plasmon resonance,SPR）快速检测方法，并对方法进行验证。方法 分别将牛抗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型D抗原多克隆抗体标记至SPR芯片表面，捕获脊髓灰质炎病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型D抗原，监测芯片表面信号响应值变化，确定D抗原含量与响应信号的关系，建立检测D抗原含量的SPR方法，并对方法进行线性、专属性、精密性、准确性验证。分别采用建立的SPR法和ELISA法检测6批次Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型sIPV单价原液D抗原含量，对2种方法的检测结果进行比较分析，以对该方法的可行性进行补充验证。结果 3个型别D抗原含量与响应值均呈较好的线性关系，相关系数（R2）均在0.99以上；3个型别之间有一定程度的交叉反应，但交叉反应响应值明显低于阳性反应响应值；3个型别重复检测的相对标准偏差（relative standard deviation,RSD）分别为3.1%、1.2%、1.4%，中间精密度验证的RSD分别为5.6%、2.0%、2.7%，均在8%以内，低于ELISA法可接受的15%以内；准确性验证的回收率分别为85.8%、105.1%、88.4%，在80%～120%范围内；6批次单价原液与ELISA法测定D抗原含量结果比较，Ⅰ、Ⅱ型差异无统计学意义（t分别为1.924和-0.901,P分别为0.083和0.389），Ⅲ型差异有统计学意义（t=-2.617,P=0.026）。结论 建立了可快速、大通量检测sIPVⅠ、Ⅱ、Ⅲ型D抗原含量的SPR方法，该方法精密性和准确性良好，为疫苗生产全流程监测和质量检测提供了更多的方案。

关键词： 埃可病毒11型(Echo11)   急性弛缓性麻痹   非脊髓灰质炎肠道病毒   基因特征  

摘要： 目的 分析广西11株人类埃可病毒11型（Echovirus 11,Echo11）VP1编码区基因特征，为动态掌握广西Echo11的遗传进化规律和流行趋势提供科学依据。方法 收集2015—2019年广西各市/县/区疾病预防控制中心采集的急性弛缓性麻痹（acute flaccid paralysis,AFP）病例以及接触者粪便标本中分离到的非脊髓灰质炎肠道病毒（non-polio enterovirus,NPEV），提取核酸后采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）扩增VP1完整编码区，并对反应产物进行序列测定。对鉴定出的11株Echo11毒株进行序列分析，同时与美国生物技术信息中心网站（National Center for Biotechnology Information,NCBI）中收录的55株Echo11病毒株序列构建基因进化树。结果 2015—2019年从1 493例AFP病例及接触者中分离出160株NPEV，分离率为10.72%(160/1 493)，其中11株为Echo11。相似性比对结果显示，11株Echo11分离株之间的核苷酸相似性为95.5%～100.0%，氨基酸相似性为93.1%～100.0%，与之对应Gregory原型株的核苷酸相似性为75.0%～76.9%，氨基酸相似性为83.2%～88.6%；与广东株（MN121644）、福建株（MG922543）、四川株（LC361288）、河南株（MK360002）的核苷酸相似性为96.1%～98.9%，氨基酸相似性为93.4%～100.0%。本次研究中的11株Echo11分离株均分布于D5基因亚型分支上，与我国2016—2019年广东省、福建省、四川省、河南省分离株亲缘关系较近，同处于D5基因亚型分支簇上。结论 D5基因亚型是广西Echo11的优势传播亚型。应针对Echo11开展持续性监测，尤其是环境监测，可作为跟踪人群中Echo11流行情况的辅助评估工具，对相关疾病防控具有重要的参考价值。