关键词： 脊髓灰质炎后综合征   下肢乏力   行走不稳   头颅MR   患者  

摘要： 患者男性，82岁，闪右下肢乏力1年，加重伴行走不稳3个月于2011年7月收住我院。患者1年前无明显诱因出现有下肢乏力，行走时拖步，行头颅MR检A未见明娘异常，

关键词： 新疆和田地区   知识知晓   预防接种   少数民族   脊髓灰质炎疫苗   新疆维吾尔自治区   调查   塔克拉玛干  

摘要： 和田地区地处新疆维吾尔自治区南疆的塔克拉玛干大沙漠的南缘，全地区辖7县l市，总人口201．44万，其中维吾尔族占96．3％。2011年，新疆和田地区发生输入性脊髓灰质炎病例引起的局部暴发疫情；2011年9月一2012年4月，在全疆开展了5轮脊髓灰质炎疫苗的儿童强化免疫工作，南疆五地州对土5040岁的成人也进行了4轮的强化免疫。

关键词： 脊髓灰质炎   病毒样颗粒   基因工程   制备工艺  

摘要： 脊髓灰质炎(Poliomyelitis)是由脊髓灰质炎病毒(Poliovirus)感染所引起的以肢体麻痹为主的急性肠道传染病，主要影响五岁以下的儿童。目前，可以通过疫苗接种来预防脊髓灰质炎病毒的传播。在我国应用的脊髓灰质炎预防性疫苗主要为口服减毒活疫苗，在国外主要是应用灭活疫苗。但灭活疫苗因无法自主生产因而成本较高。口服减毒活疫苗优势在于生产成本较低。适合在我国广泛应用。然而，由于减毒疫苗相关麻痹型脊灰(vaccine-associated paralytic poliomyelitis，VAPP)及其衍生脊髓灰质炎病毒(vaccine-derived poliovirus，VDPV)风险的存在，需要研制新型的低成本有效疫苗。基因工程重组疫苗代表了新型疫苗的发展方向，因此，本文针对脊髓灰质炎开展了基于病毒样颗粒(virus-like particle，VLP)的基因工程疫苗的探索研究。病毒样颗粒是含有某种病毒一个或多个结构蛋白的空心颗粒，形态结构上与天然病毒相同或相似，免疫原性强。病毒样颗粒不含有病毒核酸，不能自主复制，因此无致病性，在疫苗研发中具有广泛的应用前景。\n 在此背景下，本文采用酿酒酵母表达系统来制备脊髓灰质炎病毒VLP。酵母表达系统具有可规模化工业生产、成本低且得到FDA认证等特点。本课题将脊髓灰质炎病毒的P1和3ABC基因进行了优化以提高表达并将其重组到酿酒酵母表达系统中。电镜观察共表达P1和3ABC基因可产生脊髓灰质炎病毒的VLP。Western-blot检测确定表达的蛋白为脊髓灰质炎病毒的蛋白。脊髓灰质炎病毒的VLP制备成功为研究预防脊髓灰质炎病毒感染的基因工程疫苗进行有益的探索。

关键词： 脊髓灰质炎病毒   时空动力学   适应性进化   疫苗研发  

摘要： 脊髓灰质炎是一个古老的人类疾病，它由脊髓灰质炎病毒引起。这种疾病在19世纪末突然开始流行，在20世纪中期成为全球最恐怖的疾病之一，对于疾病突然流行的原因目前并不清楚。本研究基于可利用的病毒核酸序列，采用贝叶斯进化分析平台追溯脊髓灰质炎病毒最近共同祖先的形成时间，起源地理和种群的动态变化。其次，我们也对脊髓灰质炎病毒衣壳区VP1片段进行了适应性进化分析，通过了解其变化规律以期为其它病毒（如EV-71）的疫苗研发提供理论依据。另外，脊髓灰质炎于1953年首次在中国爆发，以VP1片段构建的最大分枝可信树显示，野生2型脊髓灰质炎病毒(WPV2)具有更长的流行历史，其最近共同祖先产生的时间为1865.5(1838.0-1892.2，95％CI)，野生3型(WPV3)和野生1型(WPV1)最近共同祖先产生的时间分别为1890.3(1874.4-1906.7，95％CI)，1924.9(1916.5-1932.5，95％CI)。有意思的是，三个血清型病毒株最近共同祖先形成的时间分别位于流行史的不同的阶段，其中，WPV2位于脊髓灰质炎的散发阶段，WPV3位于脊髓灰质炎的流行阶段，而WPV1位于脊髓灰质炎的全球扩张3个不同的流行阶段，这表明WPV3可能与脊髓灰质炎的流行出现有关，WPV1则对脊髓灰质炎的全球扩张可能起到关键作用，而WPV2可能对脊髓灰质炎的爆发作用较小。具体分析表明，WPV2首先在东南亚及其相邻地区流行，然后进一步传入非洲，美洲等地;WPV3则首先在欧洲与北美地区流行，1930s传入发展中国家;WPV1首先在美洲流行，在1940s传入东地中海地区，1940s末进一步向发展中国家扩散并导致全球流行。基于核酸序列的BSP分析显示，由WPV1引起的脊髓灰质炎感染人口自1940s中期急剧增加，在1950s达到流行的高峰，并一直持续至1990s初;而由WPV3造成的脊髓灰质炎在1930s-1960s期间一直处于低水平流行，直到1965年后才出现急剧上升。由于大量疫苗的竞相出现，WPV2于1999年被灭除，而WPV1和WPV3从1990s早期后也急剧减少。我们的分析结果从分子水平进一步证明了WPV1是引起脊髓灰质炎在全球范围流行的主要致病株。\n 脊髓灰质炎于1953年首次在中国爆发，包含7个基因型的WPV1和1个基因型的WPV3的流行。本文根据所收集的序列分析，发现中国地区还流行2个WPV1的新基因型(CN-6，CN-7)，暗示了在中国地区存在多种不同基因型病毒株的共流行。谱系地理学分析表明，取样自中国的WPV1均由其他国家传入中国。最近共同祖先形成时间的推断表明，CN-5和CN-7基因型具有较长的流行历史，可能对中国早期脊髓灰质炎的流行发挥了重要作用，而CN-1-4，CN-6则在1970s后才相继传入中国。另外，根据所构建的最大分枝可信(MCC)树，来自新疆的野生3型病毒株约在1970s中期从格鲁吉亚（欧洲）传入中国，远晚于3型的首次分离时间(1957)，表明中国曾存在其他基因型的3型病毒株。在与中国相邻的阿富汗和巴基斯坦地区仍然存在WPV1和WPV3病毒株的流行，并有传入中国的风险，因此至少在当前阶段，保持高水平的疫苗覆盖率，依然是阻止病毒输入的最有效方法。

关键词： FLOW cytometry   POLIOVIRUS   VIRUS diseases -- Diagnosis   VIRUS diseases -- Prevention   CELL culture  

摘要： Rapid and efficient detection of viral infection is crucial for the prevention of disease spread during an outbreak and for timely clinical management. In this paper, the utility of Tat peptide-modified molecular beacons (MBs) as a rapid diagnostic tool for the detection of virus-infected cells was demonstrated. The rapid intracellular delivery mediated by the Tat peptide enabled the detection of infected cells within 30 s, reaching saturation in signal in 30 min. This rapid detection scheme was coupled with flow cytometry (FC), resulting in an automated, high-throughput method for the identification of virus-infected cells. Because of the 2-order-of-magnitude difference in fluorescence intensity between infected and uninfected cells, as few as 1% infected cells could be detected. Because of its speed and sensitivity, this approach may be adapted for the practical diagnosis of multiple viral infections.

关键词： Ⅲ型脊髓灰质炎病毒   VP1编码区   基因特征  

摘要： 脊髓灰质炎（脊灰）是由脊灰病毒（Poliovirus, PV）引起的一种急性传染病，主要发生于5岁以下的儿童，病毒感染后大约有近1％出现显性感染症状，患者可出现典型的不对称麻痹，并且残留瘫痪。本病没有特效治疗方法，只能通过接种疫苗预防。随着大规模使用口服脊灰减毒活疫苗（Oral Poliomyelitis Attenuated Vaccine，OPV）或脊灰灭活疫苗，全球脊灰的发病率已大幅度降低。我国从1996年以来，未曾发现本土脊灰野病毒病例，世界卫生组织于2000年宣布，包括中国在内的西太平洋地区已经证实无脊灰。由于在我国周边部分国家（巴基斯坦、阿富汗）仍然有脊灰野病毒流行，我国目前预防脊灰的主要手段仍使用OPV作为主要措施，疫苗病毒在人类肠道中复制时可能发生回复变异，某些位点尤其是神经毒力位点发生突变的病毒株可以引起疫苗相关麻痹型脊灰病例。未免疫人群会受到服苗者排泄到外环境中的变异的疫苗病毒感染，而造成其循环，在人群中循环到一定程度（I、III型PV的VP1编码区核苷酸变异率＞1%、II型PV的VP1编码区核苷酸变异率＞0.5%），就称为脊灰疫苗衍生病毒（VDPV）。由于神经毒力回升的VDPVs会造成更多的病例，将来如果我国停止使用OPV，这将对我国维持“无脊灰状态”带来严峻的挑战，目前，阻止脊灰野病毒输入和防止VDPVs发生人际间传播的关键，是在人群中维持较高的OPV免疫覆盖率，同时要保持急性弛缓性麻痹（AFP）病例监测系统和脊灰实验室网络的敏感性。 目的 研究2011年中国大陆AFP病例粪便标本中分离到的Ⅲ型PV的分子生物学特征，为中国大陆维持“无脊灰状态”提供科学依据。 方法 粪便标本经处理后接种于RD和L20B两种细胞，观察致细胞病变效应，利用中和实验将混合型PV分成单一的血清型，提取病毒核酸，采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）对Ⅲ型PV的VP1编码区进行扩增，并对PCR产物进行核苷酸序列测定和分析。分析VP1编码区的核苷酸突变热点和神经毒力位点，建立亲缘关系进化树并分析毒株间的进化关系。 结果 2011年中国大陆从AFP病例监测系统中共分离到159株Ⅲ型PV，包括149株疫苗类似株和10株免疫缺陷者排出的VDPV（iVDPV），未发现Ⅲ型脊灰野病毒（WPV）。159株PV均在VP1编码区已知的神经毒力位点nt2493发生回复突变，是一个突变热点。 结论 突变热点的存在说明PV的VP1区的核苷酸变异并不是随机分布的，突变热点的发生可能与PV的生物学特性有一定的关系。从宁夏发现的10株iVDPVs与以往发现的iVDPV基因进化上无相关性，证明是新发现的iVDPV。本研究对III型PV的VP1区的分子特征研究为及时发现VDPVs传播和WPV的输入性，继续维持我国“无脊灰”状态提供了实验室依据。

关键词： 麻疹   脊髓灰质炎   血清学  

摘要： 目的 探讨平昌县麻疹与脊髓灰质炎疫苗强化免疫效果.方法 收集本县麻疹与脊髓灰质炎疫苗预防接种的儿童7751例,进行麻疹与脊髓灰质炎疫苗强化免疫,然后进行血清学监测,麻疹IgG抗体和脊髓灰质炎病毒监测试剂由武汉康姝生物技术有限公司提供试剂,根据试剂盒说明书,按照酶联免疫吸附实验—双抗体夹心法进行操作.结果 本组麻疹共接种7751例,麻疹IgG抗体血清学监测阳性5694例,其中＜1.5岁阳性325例,1.5-4岁阳性1618例,4-7岁阳性1806例,＞7岁阳性1945例.脊髓灰质炎病毒血清学监测阳性5479例,其中＜1.5岁阳性338例,1.5-4岁阳性1588例,4-7岁阳性1781例,＞7岁阳性1772例.结论 通过对本组资料的调查,发现小于1.5岁儿童阳性率比其他三个年龄组高,说明近年来预防接种工作越来越入人心,广大儿童家长已逐渐认识到预防接种的重要性.