关键词： 脊髓灰质炎减毒活疫苗   批签发   质量分析  

摘要： 脊髓灰质炎(简称脊灰)是由脊灰病毒感染引起的急性传染病,严重者可瘫痪甚至死亡,全球免疫接种疫苗是消灭脊灰的唯一解决方案[1]。几十年来,口服脊灰减毒活疫苗(oral polio vaccine,OPV)一直是免疫接种的支柱,是根除野生型脊灰病毒工作的重要组成部分。OPV能够在胃肠道中复制,诱导肠道黏膜免疫,并在个体随后接触活病毒时减少病毒脱落,有效建立免疫屏障。

关键词： 脊髓灰质炎疫苗   细胞改变   医学创新   基因图谱   现代医学   布里斯托尔   HeLa细胞   知情同意  

摘要： 上周在布里斯托尔大学,几位Lacks家族的后代出席了Henrietta Lacks真人尺寸铜像揭幕仪式,这位美国妇女的细胞改变了现代医学的方向。Lacks 31岁死于宫颈癌,而她的细胞,在她未知情同意的情况下,破天荒地在体外存活并繁殖。自那时起,这些HeLa细胞一直被复制并应用于科学、医学创新,包括研制脊髓灰质炎疫苗以及绘制基因图谱。

关键词： 脊髓灰质炎病毒   RD细胞   L20B细胞   种属   细胞间交叉污染   细胞系质量控制   二代测序技术  

摘要： 目的应用二代测序(Next generation sequencing,NGS)技术鉴定用于脊髓灰质炎(脊灰)病毒分离的RD和L20B细胞种属来源,以判断细胞间是否存在交叉污染。方法选用新复苏的RD和L20B细胞作为对照组,传代多代的RD和L20B细胞作为实验组,观察在接种两种非脊灰肠道病毒株后的细胞形态和细胞病变(Cytopathic effect,CPE),检测细胞的支原体和细胞对脊灰病毒的敏感性;利用NGS技术对细胞进行高通量测序和比对,以鉴定细胞的种属来源、识别交叉污染。结果与对照组RD细胞相比,实验组RD细胞形态出现膨胀、条柱形等变化,实验组L20B细胞形态相似;接种两种非脊灰肠道病毒毒株后,对照组RD细胞发生CPE而L20B细胞未发生CPE,实验组两种细胞均发生CPE。对照组和实验组两种细胞支原体检测均阴性,且敏感性结果均处于正常范围内。经NGS技术鉴定,实验组RD和L20B细胞均属于人源细胞,L20B细胞的种属来源与预期不符。结论实验组RD和L20B细胞间存在交叉污染;NGS技术能够快速、准确、全面地鉴定细胞系的种属来源,及时识别细胞间交叉污染,可进一步推动脊灰病毒分离用细胞系质量控制工作。

关键词： 脊髓灰质炎疫苗   演艺生涯   青年形象   顾方舟  

摘要： 在我的演艺生涯中,饰演过不同时代的青年形象,这些人物在他们各自的领域内不断燃烧自己、发光发热,为了自己的信仰,为了祖国的未来,他们挥洒青春汗水,忘我不懈奋斗,甘于奉献一切,树立起一座座历史的丰碑。其中,2021年参演的“主题系列剧”《理想照耀中国》中《希望的方舟》这部作品,所饰演的中国脊髓灰质炎疫苗之父、“人民科学家”顾方舟教授,让我感受最多、印象最深、触动最大。

关键词： 细菌繁殖体   流感病毒   冠状病毒   脊髓灰质炎病毒   超高压  

摘要： 目的研究物理超高压处理对悬液中和载体上微生物的杀灭效果。方法分别将细菌和病毒悬液及染病毒载体布片装在离心管或冻存管中,并用真空封口机封装在纤维袋等容器内,采用高压容器与增压机对其进行超高压处理,再用平皿倾注法和终点稀释法分别对不同压力与保压时间处理后的样本进行活菌计数及病毒滴度测定。结果在室温条件、静压力≥600 MPa、保压1 min时,对离心管内悬液中大肠埃希菌、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌的杀灭对数值分别为8.08(完全杀灭)、5.53和3.07;在室温条件、静压力≥500 MPa、保压3 min时,对冻存管悬液中和纤维袋内载体布片上人类冠状病毒与流感病毒的灭活对数值均≥4.00;在室温条件、静压力为700 MPa、保压8 min时,对冻存管内悬液中脊髓灰质炎病毒的灭活对数值为1.50,对纤维袋内载体布片上脊髓灰质炎病毒的灭活对数值为3.24。结论物理超高压处理对细菌繁殖体有较好的杀灭效果,对亲脂病毒的杀灭效果好于亲水病毒。

关键词： Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗   Vero细胞   残余DNA   荧光定量PCR  

摘要： 目的建立与国际接轨的Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(inactivated poliovirus vaccine made from Sabin strain,sIPV)Vero细胞残余DNA荧光定量PCR(q-PCR)检测方法及相应质量标准。方法按照《中国药典》三部(2020版)通则3407第三法,选择通则建议的Vero细胞核酸引物和探针,通过优化磁珠法提取核酸以及PCR反应体系和条件,采用q-PCR法Vero细胞DNA定量国家标准品,对sIPV产品进行线性范围、精密度和回收率验证。在此基础上,与国内5家sIPV生产研究企业和2家省药检院协作开展适用性验证的研究,并对检测结果进行统计分析,建立q-PCR法检测sIPV成品Vero细胞DNA残留量的可接受限度标准。结果优化的q-PCR方法在0.002~200 pg/μL范围内呈良好的线性关系,R2=0.999;精密度验证结果试验内、试验间变异系数分别为16.7%和27%;样品回收率在50%~150%范围内,RSD≤30%,符合《中国药典》三部(2020版)通则3407第三法相关要求。协作研究各企业sIPV成品Vero细胞DNA残留量平均为0.07~7.8 pg/剂,检测结果最大值<50 pg/剂,各实验室显示出良好的适用性;用q-PCR法检测已知50 pg Vero细胞核酸标准品(杂交法用),共获得55个有效检测值,统计计算结果为50.00 pg(95%CI:44.00~56.01 pg),与理论值差异无统计学意义(P>0.05)。结论成功建立了sIPV产品适用的Vero细胞残余DNA q-PCR检测方法,该方法具有良好的适用性,可用于sIPV成品的质量评价,限度标准定为不高于50 pg/剂具有可行性。

关键词： 脊髓灰质炎病毒   卫生系统   污水系统   脊灰疫苗   下水道  

摘要： 当地时间6月22日,英国卫生日部旗下英国卫生安全局(HPA)发布消息称,工作人员在今年2~5月间伦敦北部和东部一些街区的下水道中持续发现了含有脊髓灰质炎病毒的污水样本,且与现有脊灰疫苗类型不同,归类于“疫苗衍生”2型脊灰病毒。HPA官员随后称,每年伦敦污水系统中偶有含脊灰病毒的一份样本.

关键词： 脊髓灰质炎   脊髓灰质炎疫苗   Sabin株  

摘要： 脊髓灰质炎(简称脊灰)是一种仅能通过接种疫苗预防,尚无特异性治疗方法的急性肠道传染病。目前,全球消灭脊灰行动已到最后阶段,在所有国家被证实阻断脊灰野病毒(wild polio virus,WPV)传播后,全球将停止使用口服脊灰减毒活疫苗(oral polio vaccine,OPV),进入后脊灰时代。世界卫生组织(World Health Organization,WHO)倡导发展中国家生产、使用Sabin株脊灰灭活疫苗(inactivated polio vaccine made from Sabin stains,sIPV)。2015年,全球首剂sIPV单苗在我国获批上市,并于2016年纳入国家儿童免疫规划(National Immunization Program,NIP),开始实施IPV/bOPV序贯免疫接种程序。sIPV自研发及上市以来,安全性和免疫原性良好,被WHO纳入全球疫苗采购目录,其将作为后脊灰时代的重要产品广泛使用。本文对全球脊灰防控进程作一综述,对比两种脊灰疫苗,回顾并展望sIPV的研发和应用。

关键词： 急性弛缓性麻痹   脊髓灰质炎病毒   脊髓灰质炎   病原学监测  

摘要： 目的了解黑龙江省急性弛缓性麻痹(acute flaccid paralysis,AFP)病例的流行病学特征及监测系统运转情况,为维持无脊髓灰质炎(以下简称脊灰)状态和制定防控措施提供依据。方法按照WHO《脊髓灰质炎病毒检验手册》(2004年第四版)中的方法,采用鼠肺细胞(mouse L cells expressing the human poliovirus receptor,L20B)和人横纹肌肉瘤细胞(rhabdomyosarcoma,RD)对AFP病例的粪便标本进行病毒分离。结果2016—2020年在426例AFP病例的924份标本中,分离出脊髓灰质炎病毒(polioviru,PV)2株,非PV 30株。2株PV经鉴定为疫苗相似株,未发现脊髓灰质炎野病毒和疫苗衍生脊灰病毒。采集外环境污水样本211份,分离出脊灰病毒疫苗株253株,分别为PV1型32株、PV2型5株、PV3型216株。结论2016年7月以后未发现PV2型,PV3型是黑龙江省生活污水中的PV优势株。今后应进一步加强AFP病病原学监测。

关键词： 急性弛缓性麻痹   非脊髓灰质炎肠道病毒   分子鉴定   流行病学特征  

摘要： 目的了解2019年河南省急性弛缓性麻痹(acute flaccid paralysis,AFP)病例中非脊髓灰质炎肠道病毒(non-polio enterovirus,NPEV)的型别及分布情况。方法2019年河南省共报告AFP病例513例,每例病例采集双份粪便标本进行病毒分离,对NPEV阳性毒株进行VP1基因扩增和测序鉴定,序列的比对以及遗传进化树的构建通过MEGA5.1软件完成。使用Excel 2016和SPSS19软件对NPEV阳性毒株的流行病学数据进行统计分析。结果从513例AFP病例中共分离出39株NPEV,分离率为7.60%(39/513),其中18株为A组病毒,21株为B组病毒,A组和B组病毒均包含7个血清型,未分离到C组和D组病毒。A组中以柯萨奇A组病毒(coxsackievirus A,CVA)4型和CVA16为主,B组中以埃可病毒(echovirus,Echo)11型为主。NPEV阳性毒株之间的核苷酸一致性为67.4%~100.0%,与原型毒株核苷酸一致性为71.4%~85.6%。NPEV主要集中在7岁以下的散居儿童当中,分离率为84.62%(33/39),男女性别比为2.07∶1,分离率在不同年龄组之间以及不同性别之间均无统计学差异(P>0.05)。A组病毒中CVA2、CVA4和CVA16分布比较广泛,B组病毒中Echo3、Echo11和Echo30分布比较广泛。时间上除1月份以外,全年均能分离出NPEV,其中A组病毒主要发生在4~7月,分离数占到全年的66.67%(12/18),B组病毒主要发生在9月,分离数占到全年的28.57%(6/21)。结论2019年河南省分离的NPEV以B组Echo11为主要血清型,病原谱、地区分布以及不同年龄NPEV的分离率相比2018年发生了明显的变化。因此要加强监测,有针对性的进行防控,有效减少AFP的发生。