关键词： 脊髓灰质炎   疫苗衍生脊髓灰质炎病毒   调查处置  

摘要： 目的了解广州市2011-2024年脊髓灰质炎(脊灰)病毒的监测情况,以进一步加强脊灰监测,确保继续维持无脊灰状态。方法对广州市6起疫苗衍生脊髓灰质炎病毒(Vaccine-derived Poliovirus,VDPV)的发现与调查结果进行分析。结果广州市2011-2024年共报告VDPV事件6起,其中,5起事件来源于广州市猎德污水处理厂的污水样本检测,具体分型为Ⅰ型、Ⅲ型VDPV各1起,Ⅱ型VDPV 3起。1起手足口确诊病例为VDPV II型携带者。未报告脊髓灰质炎野病毒(Wild Poliovirus,WPV)、VDPV病例或循环的VDPV(Circulating VDPV,cVDPVs)病例。结论广州市在脊灰监测与防控方面保持了较高的警惕性和有效性。持续加强脊灰监测网络建设、优化疫苗接种策略、全面提高公众健康意识仍是当前维持无脊灰工作的重点。

关键词： 小儿脊髓灰质炎   疫苗接种   异常反应   护理策略  

摘要： 探寻小儿脊髓灰质炎疫苗接种后发生异常反应的护理干预策略及其效果。方法 在2021年10月至2024年10月期间,本次研究共选取了50名患有脊髓灰质炎疫苗接种异常反应的患儿作为研究对象。将这50名患儿均等划分为两个组别,对照组(共计25名)和研究组(同样25名)。其中,对照组接受的是标准的护理方式,而研究组则额外实施了全面的护理干预措施。结果 从症状改善时间、不良反应发生率、患儿舒适度评分、家属满意度及护理依从性等方面来看,研究组的表现都比对照组要好(P<0.05)。结论 对脊髓灰质炎疫苗接种异常反应患儿实施综合护理干预,能有效缩短症状改善时间,减少不良反应,让家长更为满意。

关键词： 离子色谱法   脊髓灰质炎灭活疫苗   多离子  

摘要： 目的采用离子色谱法测定脊髓灰质炎灭活疫苗(inactivated poliomyelitis vaccine,IPV)中的多离子含量,并对方法进行验证及初步应用,以期对疫苗中的多离子实行质量控制。方法色谱条件:采用阴离子交换分析柱(4 mm×250 mm),上样量:25μL,用30 mmol/L KOH淋洗液等度洗脱,流速:1.0 mL/min,柱温:25℃,电导检测器检测,检测时间:15 min,用Chromeleon色谱工作站记录并分析数据。对建立的方法进行系统适用性、专属性、线性、准确性、重复性验证,并确定该方法的最低检出限和最小定量限。采用建立的方法检测10批Sabin株IPV(sIPV)。结果连续进样8次,氟离子、氯离子、硫酸根离子、硝酸根离子、磷酸根离子峰面积相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)均小于2.0%;该方法检测氯离子、氟离子、硝酸根离子、磷酸根离子、硫酸根离子专属性较强;在2.5~150μg/mL范围内,上述离子与色谱峰面积呈良好的线性关系,r^(2)均大于0.995;向sIPV滤出液中分别添加低(10μg/mL)、中(25μg/mL)、高(50μg/mL)浓度的多离子混标溶液,重复测定6次的回收率在93.69%~106.70%之间,RSD在0.05%~0.7%之间;氟离子、氯离子、硫酸根离子、硝酸根离子、磷酸根离子的最低检出限分别为8.3、2.5、5.1、0.025、0.021μg/mL,最小定量限分别为0.025、8.3、0.025、0.45、0.063μg/mL。采用建立的方法在10批sIPV中均未检出氟离子、硫酸根离子和硝酸根离子,但检出了氯离子和磷酸根离子。结论离子色谱法测定IPV中多离子浓度变化简便、快捷、灵敏、重现性好,是一种有效的检测手段,可帮助企业内控该种疫苗的质量。

关键词： 脊髓灰质炎病毒   反向遗传学   病毒拯救  

摘要： 新型脊髓灰质炎（脊灰）疫苗的构建和病毒减毒机制的探索需要建立脊灰病毒的反向遗传学操作平台。本研究以pGEM T-easy为载体构建Sabin株I型全长cDNA感染性克隆质粒。经体外转录为RNA后转染至Vero细胞进行病毒拯救，48小时后观察到明显的细胞病变效应，获得Sabin株I型拯救病毒，并对拯救病毒的各项生物学特征进行观察和验证。拯救病毒的中和活性与Sabin株I型母株相同，病毒感染性滴度为1×10～9TCID50/mL，保留了在Vero细胞中复制的特性，与母株相比具有相似的生长曲线，在12～36 h病毒呈指数增长，在36 h复制达到最高峰。透射电子显微镜检测Sabin株I型拯救病毒，可见20～30 nm二十面体病毒颗粒。本研究成功构建脊灰Sabin株I型全长感染性克隆载体，获得脊灰Sabin株I型拯救病毒，为进一步研究脊灰病毒的致病机制及新型疫苗的研发提供了技术平台。

关键词： 病毒灭活   验证   检测限   细胞敏感度   精密度   应用性  

摘要： 目的建立Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(Vero细胞)病毒灭活验证方法,并进行方法学验证。方法将Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型脊髓灰质炎病毒进行系列梯度稀释,分别接种于Vero细胞,进行2次盲传扩增,观察细胞病变情况。对该方法的最低检测限及细胞对病毒的敏感度进行摸索,并对该方法的精密度(重复性和中间精密度)和适用性进行验证。结果建立的病毒灭活验证方法对Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型脊髓灰质炎病毒的检测限分别为-2、-1、0 lgCCID_(50)/mL。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型脊髓灰质炎病毒对Vero细胞的最小接种浓度均为2 lgCCID_(50)/mL,在第7天均可观察到Vero细胞病变,即该细胞的敏感度为2 lgCCID_(50)/mL。同一检验人员重复检测同一批样品6次结果一致;2名检验人员在不同时间重复检测同一批样品6次结果一致;样品在-70℃及以下存放7 d与未冻存的样品检验结果一致;分别对生产过程中产生的Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(Vero细胞)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型单价灭活病毒液及原液各3批进行病毒灭活验证,取样当天和在-70℃及以下存放7 d后检验的样品的灭活验证检验结果一致,表明该方法的精密度和适用性均较好。结论Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(Vero细胞)病毒灭活验证方法能有效检测样品的灭活状态,可用于对病毒灭活效果的评价及工艺过程中对中间品等关键步骤的监控。

关键词： 脊髓灰质炎病毒疫苗,灭活   无酚红培养基   制剂   贮存效期  

摘要： 目的验证无酚红M199培养基的贮存效期,同时探索无酚红M199效期对无酚红Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(inactivated Sabin strain poliovirus vaccine,sIPV)关键质量属性的影响。方法对贮存0、6、12、18、24、30、36及42个月的3批次无酚红M199干粉培养基进行外观、澄清度、pH、干燥失重、细菌内毒素、微生物限度等物理化学性质及微生物性质长期监测;检测用贮存36个月并检定合格的无酚红M199制备的sIPV成品关键质量属性;将近效期和远效期无酚红M199制备的各3批sIPV分别贮存于37℃和25℃进行稳定性监测,检测D抗原含量,评价其稳定性;用2组sIPV免疫大鼠,检测大鼠血清抗体效价,评价其免疫原性。结果无酚红M199干粉培养基于2~8℃贮存42个月后的外观、澄清度、pH、干燥失重、细菌内毒素、微生物限度等均合格;用贮存36个月无酚红M199所制备sIPV成品的pH、D抗原、蛋白含量、Vero细胞DNA残留量、牛血清白蛋白残留量、Vero细胞蛋白残留量、游离甲醛含量等各项检定结果均符合中国药典2020年版三部和企业标准要求;用贮存36个月无酚红M199制备的sIPV效价合格、稳定性良好且与远效期无酚红sIPV免疫原性趋势一致,效力(t=-0.15~2.17,P>0.05)和诱导中和抗体水平(t=-1.46~2.02,P>0.05)差异均无统计学意义。结论用贮存至36个月的无酚红M199制备的sIPV成品稳定性较好,近效期和远效期无酚红M199制备的sIPV产品质量属性、免疫原性及稳定性趋势一致,且对产品质量无影响,无酚红培养基的效期初步可定为36个月。

关键词： 急性弛缓性麻痹   疫苗衍生脊髓灰质炎病毒   血友病   流行病学调查  

摘要： 2021年4月,浙江省1例急性弛缓性麻痹(AFP)男婴在上海市复旦大学附属儿科医院治疗期间采集的2份粪便标本检出Ⅰ型疫苗衍生脊髓灰质炎(脊灰)病毒(VDPV),VP1区核苷酸变异数分别为12和14个。病例有3剂次脊灰疫苗免疫史,入院时右下肢近端肌力Ⅲ级,远端Ⅱ级。经对症治疗后,右下肢活动明显好转,肌力基本恢复,予以出院。病例后续采集的第8~12份粪便标本未再检出VDPV;密切接触者粪便标本也未检出VDPV,病例居住地县区各医疗机构、居住地周围及邻近村和乡镇未发现类似病例。由于病例未出现VDPV所致脊灰的相关临床症状,专家小组结合流行病学调查结果、实验室检测结果及脊灰疫苗免疫史等排除脊灰,诊断为血友病A型。本次事件跨省(市)协作,处置及时,未造成病毒进一步传播。提示应保持AFP病例监测系统的敏感性,增加环境监测手段,提高脊灰疫苗接种率,防止病毒传播扩散。

关键词： 高效液相色谱法   脊髓灰质炎灭活疫苗   甲醛   含量测定  

摘要： 目的建立Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(Vero细胞)中游离甲醛含量柱前衍生-高效液相色谱检测方法,并进行验证及应用,以期为测定疫苗中游离甲醛含量提供新的方法。方法样品用2,4-二硝基苯肼衍生后,经C18色谱柱(5μm,120?,4.6 mm×250 mm)分离,分别对检测波长、流动相比例、流速、衍生时间、温度、缓冲液和衍生容器等检测条件进行优化,并对方法进行专属性、线性、重复性、准确性、检测限和定量限、耐用性验证。采用优化的方法检测20批脊髓灰质炎灭活疫苗(Vero细胞)中游离甲醛含量。结果色谱条件:以乙腈∶水体积分数70∶30为流动相,流速0.6 mL/min,波长352 nm进行测定;衍生条件:加入2,4-二硝基苯肼乙腈溶液0.5 mL和pH 5.0的缓冲液0.25 mL,60℃水浴20 min。该色谱分离条件能够有效分离2,4-二硝基苯肼及甲醛衍生物,且乙醛对测定结果无影响;甲醛标准品浓度在0.05~100μg/mL范围内与峰面积线性关系良好,r为0.9999;重复性试验中6次检测结果的相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为0.36%;9份加标供试品溶液甲醛含量回收率在102.0%~107.0%之间;检出限和定量限分别为0.025和0.05μg/mL;样品衍生后48 h能够稳定存在,耐用性较好。同一批次样品结果重复性较好,甲醛含量在4.5~9.9μg/剂之间。结论建立的方法具有测定范围宽、线性好、准确性高等优点,能够对Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(Vero细胞)中游离甲醛进行准确定量,可作为疫苗产品游离甲醛含量的辅助检测方法,对疫苗批签发和质量监管具有重要意义。

关键词： 埃可病毒11型(Echo11)   急性弛缓性麻痹   非脊髓灰质炎肠道病毒   基因特征  

摘要： 目的 分析广西11株人类埃可病毒11型（Echovirus 11,Echo11）VP1编码区基因特征，为动态掌握广西Echo11的遗传进化规律和流行趋势提供科学依据。方法 收集2015—2019年广西各市/县/区疾病预防控制中心采集的急性弛缓性麻痹（acute flaccid paralysis,AFP）病例以及接触者粪便标本中分离到的非脊髓灰质炎肠道病毒（non-polio enterovirus,NPEV），提取核酸后采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）扩增VP1完整编码区，并对反应产物进行序列测定。对鉴定出的11株Echo11毒株进行序列分析，同时与美国生物技术信息中心网站（National Center for Biotechnology Information,NCBI）中收录的55株Echo11病毒株序列构建基因进化树。结果 2015—2019年从1 493例AFP病例及接触者中分离出160株NPEV，分离率为10.72%(160/1 493)，其中11株为Echo11。相似性比对结果显示，11株Echo11分离株之间的核苷酸相似性为95.5%～100.0%，氨基酸相似性为93.1%～100.0%，与之对应Gregory原型株的核苷酸相似性为75.0%～76.9%，氨基酸相似性为83.2%～88.6%；与广东株（MN121644）、福建株（MG922543）、四川株（LC361288）、河南株（MK360002）的核苷酸相似性为96.1%～98.9%，氨基酸相似性为93.4%～100.0%。本次研究中的11株Echo11分离株均分布于D5基因亚型分支上，与我国2016—2019年广东省、福建省、四川省、河南省分离株亲缘关系较近，同处于D5基因亚型分支簇上。结论 D5基因亚型是广西Echo11的优势传播亚型。应针对Echo11开展持续性监测，尤其是环境监测，可作为跟踪人群中Echo11流行情况的辅助评估工具，对相关疾病防控具有重要的参考价值。

关键词： 脑膜炎, 脑膜炎球菌性   四价流脑结合疫苗   联合接种   安全性   临床试验  

摘要： 目的探讨3～5月龄婴儿四价流脑结合疫苗(MPCV-ACYW)与灭活脊髓灰质炎(IPV)疫苗、百白破(DTaP)疫苗联合接种的安全性, 为疫苗联合接种免疫策略提供现实世界依据。方法 2023年6—10月选取600名3月龄婴儿, 分为对照组、单独接种组和联合接种组3组, 分别在3、4、5月龄同时或单独接种MPCV-ACYW、IPV和DTaP疫苗, 观察每剂接种后30 d内的不良反应发生情况。结果 600名研究对象均完成至少1次接种, 均进入安全性数据分析。对照组(100名)、单独接种组(250名)和联合组(250名)的年龄分别为(101.20±7.88)、(102.26±7.94)、(102.35±7.76)d;身长分别为(63.00±3.02)、(62.55±3.06)、(63.14±4.02)cm;体重分别为(6.90±0.77)、(6.86±0.94)、(6.99±0.95)kg;男童分别占49%、50.4%和52.4%, 差异均无统计学意义(均P>0.05)。对照组、单独接种组和联合接种组总体不良反应发生率分别为4.00%、2.80%和3.20%, 其中全身不良反应发生率为3.00%、2.40%和2.00%;局部不良反应发生率为1.00%、0.40%和1.20%, 差异均无统计学意义(均P>0.05)。不良反应以1级为主, 三组中1级不良反应发生率分别为3.00%、2.00%和1.60%, 2级不良反应发生率分别为1.00%、0.80%和1.60%, 未发生3级、4级严重不良反应, 差异均无统计学意义(均P>0.05)。3组的不良反应症状均以全身反应为主, 其中发热和腹泻症状在每组中均有个案报告, 但发生率差异无统计学意义(均P>0.05)。不良反应症状多为一过性, 自行缓解, 均痊愈。结论 3～5月龄婴儿联合接种MPCV-ACYW与IPV或DTaP疫苗具有良好的安全性。