关键词:
功能化膜制备
细菌生物膜
群感效应
微生物调控
细菌耐药性
摘要:
随着当前环境健康问题的日益严峻,人们对生态环境安全也愈发重视。细菌在材料表面的附着与生物膜形成能够引发严重生物污染及生态安全问题。细菌的附着与定殖不仅干扰材料界面正常功能,还能通过群体作用削弱抗菌剂活性增加材料表面细菌污染的处理难度。而且,材料表面的细菌聚集还会导致细菌耐药性加速传播引起更大的健康安全隐患。一些植物化学物(Phytochemicals)不仅具备优异的抗菌活性同时还能够调控细菌生物膜形成,成为未来抗菌剂的有效替代品。基于此,本文以高性能抗污染膜材料制备和材料界面生物污染及生态风险控制为目标,针对膜分离材料表面的细菌附着、生物膜形成及细菌耐药性扩散等问题,从强化抗污染功能材料制备、界面细菌群体行为调控和材料界面生物风险控制三个方面系统研究了功能化抗菌防污膜材料界面构建、材料界面细菌生物膜形成调控和细菌耐药性扩散控制机制,为当前功能性膜材料研发和表面生物污染控制提供技术参考和理论依据。主要的研究内容与结论如下:
1.高性能抗污染膜材料是膜技术的核心,本研究首先从膜材料制备角度开发了集成自由基聚合和非溶剂诱导相转化(Nonsolvent induce phase separation,NIPS)技术的功能化聚偏氟乙烯(Polyvinylidenefluoride,PVDF)超滤膜制备方法。通过在铸膜液中引入自由基引发剂并将不饱和分子单体掺入凝固浴中,实现集制备和功能化一体的膜制备方案;以两性离子磺基甜菜碱甲基丙烯酸酯(Sulfobetainemethacrylate,SBMA)作为功能单体,通过优化自由基引发剂浓度与聚合反应时间实现制备膜性能的可控性调节;相比原始PVDF膜,制备的SBMA/PVDF膜水渗透性由142.3Lm-2h-1提升至187.6Lm-2h-1,蛋白截留能力由88.9%提升至99.0%,膜在动态过滤中的抗污染能力提高了 9.8%;此外,通过以抗菌性季铵盐及离子液体单体替代凝固浴中SBMA可制备具有高抗菌能力的功能化PVDF膜,证明了集成自由基聚合和NIPS的功能化膜制备方法的广泛适用性。该部分研究为可控性抗污染功能化超滤膜的制备提供了新的思路。
2.针对材料表面细菌附着及生物膜形成问题,系统研究了植物提取物丁香酚甲醚和丁香酚的抗菌和生物膜抑制机制,并建立通过原子转移自由基聚合(Atom transfer radical polymerization,ATRP)技术在材料表面固定丁香酚甲醚的应用方案。研究发现丁香酚可破坏细菌氧化还原平衡和细胞膜通透性表现出较强的抗菌能力,细菌细胞膜外排泵MexAB-OprM基因表达显著上调;基因表达和分子对接分析表明丁香酚甲醚通过与细菌群体感应(Quorumsensing,QS)的RhIR受体蛋白竞争结合抑制QS调控基因的转录表达进而干扰细菌生物膜形成;最后利用ATRP技术实现了丁香酚甲醚保留活性基团基础上在材料表面的固定化应用。该部分研究为植物化学物在材料表面的功能化应用提供了理论依据。
3.借助植物化学物抑菌及生物膜形成调控作用,优选植物提取物香草醛(Vanillin,VL)通过ATRP技术构建了具备群体淬灭功能的PVDF超滤膜以缓解膜表面生物污染问题。研究以构建具备调控细菌生物膜形成群体行为的膜材料界面为目标,优化了 PVDF膜表面ATRP接枝VL的技术方案并借助一系列表征测试验证了 VL在膜表面的成功接枝;结果表明VL功能化PVDF膜表面的生物膜形成被抑制,通过测定细菌QS相关基因表达和酰基-高丝氨酸内酯信号分子浓度阐明聚香草醛通过抑制细菌QS系统缓解膜表面细菌生物膜形成的内在机理;制备的VL-PVDF膜在动态过滤过程中稳定膜通量相比原始PVDF膜提高51.9%。该部分研究为构建具备细菌群体行为调控功能的膜材料界面从而缓解膜生物污染提供了技术支持。
4.为深化功能性材料界面的微生物行为调控功能,减轻细菌在材料表面附着引起的细菌耐药性传播风险,本研究以植物多酚原花青素(Proanthocyanidin,PAC)为活性分子,深入解析了 PAC对细菌耐药基因转移的干扰机制,构建了具备抑制耐药基因接合转移的功能化界面。结果表明,细菌内部氧化还原水平并不是影响耐药质粒接合转移的唯一关键因素;通过分子模拟计算与生物膜形成能力测试证明PAC抑制了耐药质粒接合转移过程中松弛体形成及转运和膜转运鞭毛蛋白功能从而阻遏了耐药质粒在细菌之间的接合转移;在明确PAC可抑制细菌接合鞭毛蛋白功能机制基础上设计并构建了 PAC功能化材料表面实现对细菌耐药基因转移的有效控制。该部分研究为构建功能化材料表面控制细菌耐药性传播风险提供了重要理论支持。